(青岛大学附属医院神经内科,山东 青岛 266100)

    早发性阿尔茨海默病(EOAD)常由早老素-1(PSEN-1)、PSEN-2和淀粉样蛋白前体(APP)等基因的突变导致[1]，其中PSEN-1突变占70%～80%[2]。PSEN-1作为γ-分泌酶的重要组成部分，其突变会影响APP、NOTCH-1以及β-淀粉样蛋白(Aβ)的表达[1，3]。微小RNA(miRNA)是一类长度约22个核苷酸的内源性非编码小RNA，通过识别靶基因mRNA的3′端非编码区(3′UTR)，并与之结合以抑制靶基因的表达[4]。最近研究结果表明，多种miRNA参与调控阿尔茨海默病(AD)的病理过程，miR-101、miR-106靶向APP可促进Aβ产生[5]。 既往我们在一家族性EOAD家系中发现存在PSEN-1p.Met139Ile(c.417G>C)突变，本研究在体外建立PSEN-1p.Met139Ile(c.417G>C) 突变人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)模型，分别检测其Aβ42/Aβ40、PSEN-1、APP、NOTCH-1及microRNA-34a(miR-34a)的表达，以探讨PSEN-1p.Met139Ile(c.417G>C)突变对SH-SY5Y细胞模型的影响。现将结果报告如下。

    1 材料和方法

    1.1 细胞培养

    SH-SY5Y细胞购自上海中乔新舟公司，培养于含体积分数0.44的MEM、体积分数0.44的F12、体积分数0.10的胎牛血清、体积分数0.01的双抗及体积分数0.01的丙酮酸钠培养液中，在37 ℃、含体积分数0.05的CO2细胞培养箱中培养。本实验所用细胞的传代次数均控制在P10～P30之间。

    1.2 实验分组及处理

    将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于96孔板 ......