(河南大学第一附属医院老年神经内科,河南 郑州 475000)

    帕金森病(PD)是一种多发于中老年的慢性神经退行性疾病[1]。研究表明，PD的病理进展与细胞氧化应激[2]、凋亡率增加[3]、线粒体功能障碍[4]等紧密相关。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长度为18～25 nt的短链小RNA，目前已被证实在人类多种疾病包括PD的发生发展中发挥重要的调控作用[5-7]。研究表明，miR-29a在PD病人血浆中表达量明显减少[8-10]，表明miR-29a可能参与PD的发生发展和恶化过程。然而，miR-29a在PD中的作用及其具体的作用机制尚不明确。因此，本文通过1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12细胞构建PD细胞模型，观察miR-29a对细胞中活性氧(ROS)以及凋亡率的影响，为阐明PD发病的病理机制提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    PC12细胞由北纳生物公司提供，胎牛血清、DMEM培养基购自美国Gibco公司；MPP+、2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)和噻唑蓝比色法(MTT)试剂购自美国Sigma公司；Trizol试剂、PCR逆转录试剂盒、荧光定量PCR(qPCR)试剂盒、荧光素酶试剂盒购自上海吉玛制药技术有限公司；细胞凋亡检测试剂盒购自美国BD公司；Lipofectamine 2000购自美国Life Technologies公司；对照质粒、anti-miR-29a质粒(5′-UAACCGAUUUCAGAUGGUGCUA-3′)均购自广州锐博生物科技公司。7500荧光定量 PCR 仪购自美国ABI公司，荧光显微镜购自日本OLYMBUS公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1细胞培养方法以及模型构建 将PC12细胞培养在含体积分数0.10胎牛血清和青霉素-链霉素的DMEM培养基中 ......