朱婧,赵义康,王臻,常建华,张世平

    (陕西省人民医院麻醉科,陕西 西安 710000)

    脑缺血再灌注(I/R)损伤是一种由多种因素引起的病理过程，与脑细胞凋亡和炎症反应等密切相关[1-3]。NF-κB信号通路是一种与细胞凋亡和炎症反应关系密切的经典信号传导途径[4-6]。有研究发现，异氟烷(ISO)预处理可通过抑制脑细胞凋亡和减弱炎症反应等机制改善脑I/R损伤[7-8]。但NF-κB信号通路是否与ISO的保护机制有关尚不清楚。因此，本研究旨在探究ISO对I/R损伤的影响以及对NF-κB信号通路的调控作用。本研究利用NF-κB信号通路抑制剂，通过观察ISO对I/R大鼠脑细胞凋亡、炎症反应及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响，探讨ISO保护脑I/R损伤的作用机制是否与NF-κB信号通路有关。现将结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    SD雄性大鼠(体质量260～300 g，2～3周龄)购于空军军医大学实验动物中心，ISO购于美国Baxter公司。细胞裂解液、硝酸纤维素膜、显影液、定影液和BCA蛋白浓度测定试剂盒购于上海碧云天生物技术研究所，NF-κB p65兔多克隆抗体购于美国MILLIPORE公司，B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)兔多克隆抗体和兔源二抗购于美国Cell Signaling公司。NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)购于美国Sigma公司，肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒购于德国R&D Germany公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1I/R模型的制备、ISO预处理与实验分组I/R模型的制备：以腹腔注射30 g/L戊巴比妥钠的方法麻醉大鼠，固定大鼠去除颈前毛，并以体积分数0.75乙醇溶液对颈部皮肤进行消毒。在颈正中做切口，分离右侧颈总动脉以及颈内外动脉，将尼龙线栓(直径0.38 mm)从颈外动脉残端插入颈内动脉(约长20 mm)直至有阻力感 ......