刘新锋

    (驻马店市中心医院心血管内一科,河南 驻马店 463000)

    冠心病是由动脉粥样硬化(AS)引起的心脑血管疾病，严重影响人类的健康和生命[1]。业已证实，冠心病是一种慢性炎症性疾病[2]。有证据表明，血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡失衡是AS发展的关键步骤[3]。蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)属于HDAC家族成员，HDAC9参与心血管疾病发生和发展[4-6]。而人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)在外界因子刺激下增殖和凋亡能够参与AS的发病过程[7]。目前，有关HDAC9基因与HCASMC关系的研究鲜有报道。因此，本文探究HDAC9基因对脂多糖(LPS)诱导HCASMC增殖、凋亡及炎症反应的影响，以期为冠心病的治疗提供新的靶点。现将结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)购自美国Lifeline公司；DMEM高糖培养基、胎牛血清(FBS)购自赛默飞世尔科技有限公司；噻唑蓝(MTT)试剂和Lipofectamine 2000转染试剂均购自美国Invitrogen公司；二甲基亚砜购自北京索莱宝科技有限公司；LPS购自美国Sigma公司；Trizol试剂购自北京康为世纪生物科技有限公司；逆转录试剂盒和SYBR premix Ex Taq PCR Kit荧光定量PCR检测试剂盒均购自日本TaKaRa公司；HDAC9siRNA及阴性对照(siRNA Control)购自上海吉玛制药技术有限公司；肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-8(IL-8)ELISA检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及Western blot检测所需试剂均购自上海碧云天生物技术研究所；HDAC9抗体、β-actin抗体及辣根过氧化酶标记的二抗均购自美国Santa Cruz公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1细胞培养 HCASMC复苏后接种到含有体积分数0.10 FBS的DMEM高糖培养基的培养瓶中 ......