李一,黄婷,杨麟瀚,吴池华

    (四川省人民医院(四川省医学科学院)乳腺外科,四川 成都 610072)

    乳癌是女性肿瘤中死亡率较高的癌症之一,目前临床上常采用手术切除、放化疗等治疗手段,但是仍会出现治疗效果不佳、复发等不良情况[1-2]。阿霉素是化疗常用的治疗药物之一,在化疗过程中容易产生耐药性,严重影响病人的治疗效果[3-6]。研究结果显示,膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白2(MAGI2)可通过结合于第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)从而调控肿瘤细胞增殖、凋亡等[7]。MAGI2被证实在乳癌细胞中发挥重要的调控作用,但对乳癌耐药细胞的研究相对较少。因此,本实验通过检测MAGI2在人乳癌细胞MCF-7及阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR 中的表达量,并通过小干扰RNA(siRNA)下调其MCF-7/ADR 细胞中的表达量,观察其对细胞增殖、凋亡的影响,为提高乳癌耐药细胞的分子靶向治疗效果提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    人乳癌细胞MCF-7购自美国模式菌种收集中心,胎牛血清购自美国HyClone公司,DMEM 培养基购自美国Gibco公司,Lipofectamine 2000购自美国Invitrogen公司,细胞计数试剂盒(CCK-8)购自日本DOJINDO 公司;流式细胞术检测试剂盒购自杭州联科生物技术股份有限公司,siRNA NC质粒、siRNA MAGI2质粒购自上海吉玛制药技术有限公司,兔抗MAGI2、兔抗磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、兔抗丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)抗体、兔抗磷酸化PI3K(p-PI3K)、兔抗磷酸化AKT(p-AKT)、兔抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)购自美国Abcam 公司 ......