闫慧,徐庆科,高洪瑞,潘洋,郝岩,李健

    (青岛大学附属医院心内科,山东 青岛 266003)

    黄曲霉毒素主要由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生[1]。作为迄今为止人类所知的毒性最强的食品污染物之一,黄曲霉毒素B1(AFB1)进入人体后,可诱导组织损伤[2]。AFB1诱导组织损伤的机制十分复杂,其中氧化应激被认为是其产生毒性的重要基础[3]。氧化应激是凋亡的重要调节信号[4]。凋亡又称为程序性细胞死亡,是一种细胞自主性自身破坏的死亡形式,可引起细胞形态改变、DNA 断裂和凋亡小体形成[5-6]。WANG 等[7]研究表明,AFB1 可诱导产生过量的活性氧(ROS),触发氧化应激并诱导心肌细胞凋亡。因此,有必要找到安全有效的天然抗氧化剂,以预防或减轻AFB1诱导的心肌损伤。褪黑素(MT)是一种由松果体分泌的神经内分泌激素,具有调节生物节律、抗氧化的作用[8-9]。MT 可以很容易地进入细胞和亚细胞区室,从而在减轻氧化应激方面优于其他抗氧化剂[10]。近年来的研究表明,MT 对由氧化应激水平升高诱发的多种心脏疾病均具有治疗作用,如心肌缺血/再灌注性损伤、糖尿病性心肌病等[11-12]。但关于MT 干预黄曲霉毒素诱发的心肌损伤少见报道。因此,本研究构建AFB1所致大鼠心肌损伤模型,并给予MT 干预,探讨MT 对AFB1心肌毒性的改善作用及其机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料

    成年雄性健康SD大鼠,体质量约150 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证号为SCXK(鲁)20140007。MT 为Sigma公司产品;AFB1购于上海诚竺生物科技有限公司;抗半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)抗体和抗β-action抗体均由美国Abcam 公司提供;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)以及TUNEL试剂盒购于上海碧云天生物技术有限公司;乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶-MB(CK-MB)试剂盒为南京建成生物工程研究所产品;DAB染色液由北京中杉金桥生物技术有限公司提供;BCA 试剂盒购于北京索莱宝科技有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1动物分组及处理 适应性喂养1周后,将大鼠将随机分为对照组(A 组)、AFB1 组(B 组)和AFB1+MT 组(C 组),每 组5 只 ......