安玉,郝荣安,匡瑞霞,胡春楠,陈璐,王志国

    (1 青岛大学附属医院烧伤整形外科,山东 青岛 266071;2 青岛元美整形医院)

    肌成纤维细胞的异质性是决定病理性瘢痕发生和转归的重要机制[1]。诱导肌成纤维细胞再分化为其他类型的细胞可能是治疗病理性瘢痕的有效方法之一。机械张力是导致病理性瘢痕形成的重要因素[2]。创面愈合初期,高张力下的创面刺激成纤维细胞大量增殖聚集,成纤维细胞高表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),分化为肌成纤维细胞来维持细胞内外的力学平衡[3]。而创面愈合后期,伴随着创周张力的降低,肌成纤维细胞逐渐再分化、凋亡最终形成成熟瘢痕,或在持续高张力作用下持续异常增殖而形成病理性瘢痕[4]。机械张力参与了肌成纤维细胞形成与再分化的全部过程。在前期研究中,我们应用力学技术成功诱导皮肤成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,构建肌成纤维细胞力学模型,阐明了机械张力在瘢痕形成过程中的作用及其机制[4-7]。本文研究探讨肌成纤维细胞在微张力作用下的转归情况,为研究病理性瘢痕的转归提供理论依据。现将结果报告如下。

    1 材料和方法

    1.1 主要实验仪器及试剂

    多通道细胞应力加载仪(BF-3001C;Flex-cell公司,美国);6 孔弹性基底膜培养板(BF-3001C;Flex-cell公司,美国);CO2培养箱(Panasonic公司,日本);倒置光学显微镜(Olympus公司,日本);酶联免疫检测仪(Bio Tek公司,美国);ABI ViiATM7 SYBR Green qPCR 仪(ABI公司,美国);化学发光成像系统(ALPHA FCE 公司,美国)。Eagle培养基(CORNING 公司,美国)、FBS、含EDTA 的胰酶(Gibco公司,美国);Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒(同仁化学,日本);ELISA 试剂盒(R&D Systems公司,美国);TRIzol试剂(Ambion 公司,美国);反转录试剂盒、荧光定量PCR 试剂盒(大连宝生物工程有限公司);PCR 引物及其序列由上海生工生物工程技术服务有限公司设计合成;整合素β1、α-SMA 兔抗人单克隆抗体(Abcam 公司,英国),山羊抗兔二抗(Abgent公司,苏州),PVDF 膜、ECL发光液(Millipore公司,美国) ......