王呈,刘丽秋

    (青岛大学附属医院肾病科,山东 青岛 266003)

    作为一种公认的可以模拟肾病综合征的模型,阿霉素肾病具体机制尚不完全明确,其病理变化与人类肾病综合征相类似。作为一种抗肿瘤药物,由于具有多器官毒性,特别是肾脏毒性,阿霉素在临床中的应用被大大限制[1]。阿霉素诱导毒性的分子机制是多因素的,至今没有完全确定。到目前为止,最被接受的理论之一是它与氧化应激有关[2]。作为一种耐受性良好的降脂他汀类药物,阿托伐他汀具有抗炎、抗氧化等作用。已有研究表明,他汀类药物可以有效改善阿霉素引起的心脏毒性[3]。但是,阿托伐他汀对阿霉素引起的肾脏毒性的保护作用尚存在争议[4]。Klotho蛋白具有抑制细胞凋亡、抗氧化、抑制纤维化、调节离子转运等多种生物学作用,对细胞氧化应激也具有保护作用[5]。基于以上研究现状,本研究对阿霉素肾病大鼠进行不同时间的阿托伐他汀干预,检测大鼠肾病进展情况,并检测氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)以及klotho蛋白的变化情况,探讨阿托伐他汀对阿霉素肾病大鼠的保护作用及其对肾脏氧化应激和klotho蛋白表达的影响。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    雄性Wistar大鼠60只,8周龄,体质量(250±15)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号SCXK(京)2016-0006,饲养于青岛大学医学部动物房。阿霉素购自美国Med Chem Express,阿托伐他汀钙片(立普妥,每片20 mg)购自辉瑞制药有限公司。MDA、SOD 检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所,T-AOC试剂盒购自凯基生物公司,klotho抗体购自北京博奥森生物有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1阿霉素肾病大鼠模型建立及实验动物分组大鼠适应性喂养2 周后,随机选取20 只作为对照组,其余40只大鼠给予尾静脉注射阿霉素10 mg/kg进行造模处理,对照组给予等量生理盐水。1周后检测大鼠24 h尿蛋白,与对照组大鼠相比,尿蛋白升高有统计学意义视为造模成功。造模过程中有4只大鼠死亡。将剩余36只大鼠随机分为模型组和干预组,每组18只。干预组大鼠每天给予阿托伐他汀10 mg/kg灌胃处理,模型组及对照组大鼠每天给予1 mL/kg的生理盐水灌胃处理,持续12周。每周称体质量1次,以调节药物剂量。

    1.2.224 h尿蛋白检测 于实验第4、8、12周,从每组随机各取6 只大鼠放入清洁代谢笼中,留取24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量 ......