蒋欣,曲青山,梁韶峰,房军,孙东

    (郑州人民医院器官移植科,河南郑州 450000)

    肾脏缺血再灌注损伤(I/R)是引起急性肾损伤(AKI)的主要病因[1]。AKI和肾I/R 均导致肾功能迅速下降[2-3],但目前缺乏预防或治疗AKI的有效策略[3]。肾I/R 发展过程涉及活性氧(ROS)的产生、促炎症反应和细胞死亡等[4-7],且导致肾小管上皮细胞的损伤[8-9]。细胞凋亡是肾脏I/R 中肾小管上皮细胞死亡的主要类型[10]。长期以来川芎一直被应用于心血管疾病的治疗,如卒中[11]和冠心病[12],特别是在我国、日本和韩国应用广泛[13]。已有研究结果表明,川芎素(LC)可以保护急性缺血性肾损伤[14],而鲜见其对缺血后再灌注肾损伤保护作用的研究。因此,本研究的目的是探讨LC 对大鼠肾I/R 的保护作用,并探讨Notch通路对大鼠肾脏I/R 中介导的炎症反应和细胞凋亡的作用及其可能机制,为LC作为治疗肾脏I/R 的新策略提供数据支持。现将结果报告如下。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 选择健康雄性、SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,体质量211～248 g,购于我院实验动物中心,饲养于SPF 级动物实验室,动物自由饮食、饮水。本研究严格遵守《实验动物护理和使用指南》的执行原则。

    1.1.2 主要试剂及药物 LC 购于中国河北安国神农中草药公司;兔抗大鼠的肿瘤坏死因子α(TNFα)(ab6671)、白细胞介素-6(IL-6)(ab208113)、半胱天冬酶3(Caspase3)(ab13847)、B细胞淋巴瘤/白血病相关X 的蛋白(BAX)(ab32503)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)(ab196495)、缺口蛋白1(Notch1)(ab52301)、锯齿状蛋白1(Jagged1)(ab233101)的第一抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗兔第二抗体(ab6721)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH,ab9485)等均购于美国Abcam 公司;SYBR Green qPCR Master Mix 试剂购于Med Chem Express公司;组织蛋白抽提试剂购自上海碧云天生物科技有限公司。血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)试剂盒购于美国R&D Systems公司。

    1.2 实验方法 ......