宋海军,杨族悌,刘军,刘国磊

    (1 南阳南石医院麻醉科,河南 南阳 473000；2 河南省直第三人民医院麻醉科)

    星形胶质细胞是广泛分布于哺乳动物脑内的一类非神经元细胞，在脑缺血病理过程中发挥着保护和损伤神经元的双重作用[1-3]。高迁移率族蛋白1(HMGB1)是细胞核内一种高度保守的非组蛋白，可作为促炎因子和预警蛋白在先天性免疫应答、炎症反应及细胞凋亡等过程中发挥着重要作用[4-6]。研究证实，HMGB1在脑缺血后大量升高，且可通过促进炎症递质的释放和调控星形胶质细胞凋亡在脑缺血病理过程中发挥着重要作用[7]。丙泊酚是一种临床手术过程中常见的静脉麻醉药，被证实可通过抑制细胞凋亡和炎症递质的释放在脑损伤过程中发挥保护作用[8-9]。近年研究显示，丙泊酚可通过抑制小胶质细胞HMGB1的表达调控脑损伤免疫炎症系统[10]，但HMGB1在丙泊酚保护脑缺血诱导的星形胶质细胞损伤中的作用并不清楚。脑皮质星形胶质细胞糖氧剥夺再灌注模型是研究体内脑缺血常用的细胞模型[11]，本研究从细胞凋亡和炎症反应角度出发，首次探讨HMGB1在丙泊酚保护糖氧剥夺再灌注诱导的星形胶质细胞损伤中的作用，以期为阐明丙泊酚保护脑损伤的分子机制提供新依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    SPF级新生Wistar大鼠(体质量12～15 g)购于山东省实验动物中心。胎牛血清、DMEM高糖培养液和DMEM无糖培养液购于美国Gibco公司。丙泊酚购于美国Sigma公司。兔抗B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)抗体、Bcl-2相关X蛋白(Bax)抗体和β-肌动蛋白(β-actin)抗体均购于美国CST公司，兔抗活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)抗体和HMGB1抗体购于美国Abcam公司。噻唑蓝(MTT)试剂和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒购于南京建成生物工程研究所，BCA蛋白检测试剂盒购于美国Pierce公司。细胞凋亡检测试剂盒、ECL试剂盒及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和HMGB1的ELISA试剂盒购于上海碧云天公司 ......