张小琴,王友翠,谢俊霞

    (青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系,山东 青岛 266071)

    帕金森病(PD)是仅次于阿尔茨海默病的第二大神经退行性疾病[1-9]。PD主要的病理特征是中脑黑质多巴胺(DA)能神经元大量变性丢失，导致纹状体内DA含量减少，而变性丢失的 DA能神经元内均出现α-突触核蛋白积聚[10-13]。环状RNA是一类不具有5′末端帽子和3′末端 poly(A)尾巴、以共价键形成环形结构的RNA分子。由于呈闭合环状结构，对核酸外切酶不敏感，因此环状RNA比线性RNA更为稳定，且具有物种保守性、组织时序性及疾病表达特异性[14-20]。有文献报道，环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as)可作为miR-7海绵调控miR-7靶基因的表达[21-22]。已有研究表明，α-突触核蛋白基因的拷贝增加或点突变均可导致α-突触核蛋白积聚，从而引发PD[23-24]。而miR-7可以与α-突触核蛋白基因编码 mRNA的3′UTR 区相互作用，从而抑制其翻译[25-26]。这提示作为miR-7海绵的CDR1as基因可能参与了DA能神经元的变性丢失。因此，阐明CDR1as基因在PD中发挥的作用至关重要。本研究旨在探讨经1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的PD细胞模型中CDR1as基因的表达变化。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂及其来源

    MPP+(M0896)由美国Sigma公司提供，用双蒸水稀释至10 mmol/L，分装，-20 ℃避光保存；DMEM高糖基础培养液(01-052-1ACS)购自BI公司；TRIzol购自ambion公司；PCR逆转录试剂盒(AG11711)和SYBR Green(AG11702)购自艾科瑞生物公司；胎牛血清(澳洲源 ......