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编号:451092
宝藿苷Ⅰ对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤保护作用
http://www.100md.com 2022年8月5日 青岛大学学报(医学版) 2022年第3期
孔板,存活率,神经元,1材料与方法,1实验材料,2实验方法,3统计学处理,2结果,1不同浓度宝藿苷Ⅰ对MPP+诱导的细胞存活率的影响,2宝藿苷Ⅰ对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞α-synuclein蛋白表
     王仕颖,孙崇崇,郑丹雯,王晓雯,陈文芳

    (青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系,山东 青岛 266071)

    帕金森病(PD)是第二大常见的神经退行性疾病,主要病理表现为黑质致密部多巴胺(DA)能神经元的选择性死亡[1]。研究结果表明,α-突触核蛋白(α-synuclein)的过表达和错误折叠与PD的发展密切相关,它在病理状态下易聚集形成不溶性的纤维蛋白沉淀,导致神经元变性死亡[2]。淫羊藿是一种传统中草药,在中国被广泛用于治疗骨质疏松症、补肾壮阳、改善学习记忆功能等[3-5]。宝藿苷Ⅰ是淫羊藿的主要药理活性成分之一,多项研究已经证实宝藿苷Ⅰ具有丰富的药理作用,如抗肿瘤、抗骨质疏松等[6-7]。研究发现,宝藿苷Ⅰ可以通过抗氧化减轻大鼠的神经元损伤,还能够通过雌激素受体(ER)抑制破骨细胞的分化和骨的吸收[8-9]。但是宝藿苷Ⅰ对DA能神经元的损伤是否具有保护作用尚未见报道。本研究应用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,探讨宝藿苷Ⅰ对MPP+诱导神经细胞损伤的保护作用及其可能机制。现将结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    实验所用SH-SY5Y细胞购自中国科学院上海细胞库;宝藿苷Ⅰ购自上海同田生物技术有限公司,用二甲基亚砜(DMSO)配制成0.10 μmol/L溶液;MPP+购自Sigma公司,用磷酸盐缓冲液配制成浓度10 mmol/L的溶液;ER特异性阻断剂ICI 182,780购自Sigma公司;四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自Duchefa公司;DMEM高糖培养液和胎牛血清购自BI公司;青霉素/链霉素储存液购自北京索莱宝科技有限公司;PAGE凝胶快速制备试剂盒购自雅酶公司;兔抗α-synuclein抗体和兔抗β-actin抗体购自CST公司;山羊抗兔IgG-HRP二抗购自雅酶公司;ECL发光液购自Vazyme公司 ......

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