B细胞非霍奇金淋巴瘤病人尿液中挥发性标志物的筛选及鉴定
甲基,1材料与方法,1主要材料,2研究对象,3样品制备及挥发性有机物的筛选,4气相色谱-质谱分析,5统计学分析,2结果,1挥发性有机物的筛选和鉴定,2挥发性标志物的定量分析,3挥发性标志物的诊断价值,3讨
刘晓莉,张妮,赵龙,董琳(1 青岛市市立医院检验科,山东 青岛 266011; 2 青岛市海慈医疗集团检验科; 3 山东省千佛山医院血液内科)
非霍奇金淋巴瘤(NHL)是最常见的血液恶性肿瘤,近年来其发病率迅速上升[1]。85%的NHL为B细胞来源。根据其临床特征,B细胞NHL(B-NHL)一般分为侵袭性和惰性两大类[1]。其中惰性B-NHL约占1/3,被认为是复发难治性淋巴瘤[2-3]。
B-NHL缺乏特异的临床症状,使得其早期诊断的可行性较差。近年来,计算机断层扫描和磁共振成像方法等常用于提示诊断[4-5]。B-NHL的临床病理诊断,会给病人带来一定的穿刺痛苦和经济负担[6]。因此,需要开发一种新的无创性诊断方法,区分B-NHL的病理分型,监测其发生发展。与病理诊断和成像方法相比,检测肿瘤标志物更便捷、更经济[7]。代谢组学分析是对生物体内所有代谢物进行定量分析,寻找代谢物与生理病理变化相对关系的研究方式,是系统生物学的组成部分。疾病导致机体病理生理过程变化,最终引起代谢产物发生相应的改变,通过对某些代谢产物进行分析,并与正常人的代谢产物比较,寻找疾病的生物标记物,可为疾病诊断提供参考。因其无创性和足够的体积,尿液被认为是理想的代谢组学分析物质[8]。由于癌症引起严重的代谢紊乱,尿液挥发性有机物的综合分析可能有助于寻找癌症的代谢生物标志物[9]。本研究使用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱方法对B-NHL病人尿液中挥发性有机物进行了初步分析[10-11],以评估尿液中挥发性有机物作为B-NHL鉴别诊断标志物的可能性。
1 材料与方法
1.1 主要材料
尿液中定量化合物所用HPLC级标准品购自Sigma公司。氦(纯度为99.999%)由中国山东济宁协力特种气体有限公司生产。便携式pH值测试笔(R&D,MN,USA),聚四氟乙烯(PTFE)隔膜覆盖20 mL气相色谱GC瓶(Shimadzu,Kyoto,Japan)。SPME手工固定器和75 μm羧基聚二甲基硅氧烷纤维(Sigma-Aldrich)。GC-MS QP 2010气相色谱质谱联用仪由岛津公司生产。
1.2 研究对象
从2015—2017年在青岛市市立医院就诊的淋巴瘤病人中 ......
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