阿司匹林对口腔鳞癌细胞增殖与凋亡影响及机制
培养液,克隆,1材料与方法,1实验材料,2实验方法,3统计学方法,2结果,1不同浓度阿司匹林对SCC-9细胞生长影响,2不同浓度阿司匹林对SCC-9细胞增殖活力的影响,3不同浓度阿司匹林对SCC-9细胞克隆能力的影响
丛蓓蓓,徐颖婕,高美华,于习习,王万春,王芳(青岛市口腔医院,山东 青岛 266001 1 中心实验室; 2 口腔黏膜科; 3 药剂科)
口腔鳞状细胞癌(OSCC)目前是全球第六大常见恶性肿瘤,在癌症相关死亡率中排名第八[1]。OSCC的发生与发展是一个复杂的过程,包括大量遗传和表观遗传癌基因的积累和抑制基因的丢失,导致多种信号通路失调,从而破坏细胞增殖和细胞凋亡之间的平衡[2]。即使采取了外科手术结合放疗和(或)化疗的治疗方式,OSCC病人的5年生存率也仍保持在50%~60%[3]。虽然临床和实验室研究表明,OSCC细胞已经对临床化疗药物产生了耐药性[4],但是,上皮细胞的恶性转变需要经历很长的时间,包括多种细胞和基因的改变,故药物干预是癌症转化之前的最佳手段。阿司匹林是一种众所周知的非甾体抗炎药,常用于预防反复发作的短暂性脑缺血或卒中[5]。除了其经典的抗炎功能之外,临床和流行病学研究表明,阿司匹林可用于多种癌症的预防或治疗[6-8]。研究揭示阿司匹林在结直肠癌的化疗预防中起重要的作用[9-12],但仍需对其他的癌症,包括口腔癌,进行多项低剂量阿司匹林治疗的试验,从而明确其具体的作用机制及最佳化学预防剂量。本研究探讨不同浓度的阿司匹林对口腔鳞癌细胞SCC-9生长的影响,并检测SCC-9细胞凋亡、细胞增殖等指标。旨在为阿司匹林辅助治疗OSCC提供实验依据,增加对口腔鳞癌发病机制的了解。现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
人鳞癌细胞系SCC-9购自浙江美森细胞科技有限公司。胎牛血清购于依科赛生物科技有限公司(上海,中国)。DMEM培养液购于Hyclone公司(犹他州洛根,美国)。阿司匹林原料药、青霉素、链霉素、胰蛋白酶、甲基噻唑基四唑(MTT)细胞增殖和毒性测定试剂盒、β-actin一抗和HRP标记的二抗均购自索莱宝生物有限公司(北京,中国)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)试剂盒和Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒购于碧云天生物有限公司(上海,中国)。Trizol试剂、反转录试剂盒、荧光定量试剂盒购自艾科瑞生物工程有限公司(长沙,中国)。抗人Bcl-2一抗、Bax一抗均购自圣克鲁斯生物技术公司(得克萨斯州达拉斯,美国)。ECL发光试剂购自赛默飞世尔科技公司(马萨诸塞州沃尔瑟姆,美国)。
1.2 实验方法
1.2.1细胞培养及分组 SCC-9细胞使用含体积分数0.10胎牛血清及体积分数0.01青霉素-链霉素的DMEM培养液培养 ......
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