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编号:451055
ER-β对三阴性乳癌细胞生物学行为和IL-8表达影响
http://www.100md.com 2022年9月17日 青岛大学学报(医学版) 2022年第4期
培养液,1材料和方法,1实验材料,2实验方法,3统计学方法,2结果,1ER-β过表达慢病毒转染效率检测,2ER-β对人乳癌细胞增殖能力的影响,3ER-β对人乳癌细胞迁移能力的影响,4ER-β对人乳癌细胞凋亡
     姚瑶,吕志栋,夏菁,崔茹婷,孔滨

    (1 青岛大学附属医院乳腺病诊疗中心,山东 青岛 266100; 2 青岛大学医学部; 3 青岛市中心医院乳腺外一科)

    三阴性乳癌(TNBC)是乳癌中最具侵袭力的一种亚型,具有较高的局部复发和远处转移率,给健康带来巨大威胁[1]。目前,对于TNBC病人内分泌治疗是需要探索的领域。雌激素在乳癌中通过雌激素受体α(ER-α)和雌激素受体β(ER-β)两个核受体发挥其作用[2]。ER-β首次发现至今已有30余年,在乳癌中的确切作用仍有争议[3]。白细胞介素8(IL-8)也称作CXCL8,是趋化因子的一种[4]。IL-8被证实可联合血管内皮生长因子建立肿瘤新的脉管系统,从而促进乳癌的发生发展[5]。有研究表明,ER-β可通过炎症通路来调控IL-8等相关炎性因子进而抑制前列腺癌的发生发展[6]。同时也有研究证实,在乳癌中ER-β可上调IL-8的启动子活性,从而促进乳癌的侵袭[7]。本研究以TNBC细胞MDA-MB-231为模型,探讨了ER-β对IL-8的调控作用并进一步验证其对乳癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    人乳癌细胞株MDA-MB-231由湖北普诺赛公司提供。ER-β过表达慢病毒(Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES-puromycin,上海吉凯公司),高糖DMEM培养液(大连美仑公司),胎牛血清(进阶生物公司),人重组IL-8(苏州派普泰克公司),CCK-8细胞增殖检测试剂盒和结晶紫(北京索莱宝公司),Annexin V-7ADD/PE凋亡检测试剂盒(美国BD公司),抗ER-β、Bax、Bcl-2和Cleaved caspase-3单克隆一抗(美国CST公司),抗IL-8单克隆一抗(上海艾博抗公司),二抗及GAPDH一抗(武汉伊莱瑞特公司)。荧光显微镜、倒置相差显微镜(日本Olympus公司),酶标仪(瑞士Tecan公司),流式细胞仪(美国Apogee公司) ......

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