赵志平,王向宇,贾斌,许应星,王昌耀,王英振

    (青岛大学,山东 青岛 266071 1 医学部； 2 附属医院关节外科)

    人工关节置换术(TJA)被广泛用于治疗晚期关节疾病，可显著缓解病人的疼痛并改善关节功能[1]。然而，磨损颗粒引起的假体周围骨溶解引发的无菌性松动是导致假体失败的主要原因[2]。尽管假体周围骨溶解的病理生理机制仍不清楚，但越来越多的证据表明，从假体表面释放的聚乙烯和钛(Ti)等磨损颗粒能诱导破骨细胞形成和过度活化，并增强假体周围的破骨细胞骨吸收功能，从而导致假体周围骨溶解和随后的无菌性松动[3-4]。大量的研究结果发现，表观遗传信号分子-溴结构域蛋白4(BRD4)通过调控破骨细胞的形成，参与破骨细胞相关的溶骨性疾病，如类风湿性关节炎、骨肉瘤和骨质疏松等发生和发展[5-7]。有研究结果表明，BRD4抑制剂JQ1对破骨细胞分化有抑制作用，可防止卵巢切除小鼠骨质疏松[8]。我们先前的研究结果显示，假体周围骨溶解病人的界膜组织中BRD4蛋白的表达明显增加，Ti颗粒处理小鼠RAW264.7巨噬细胞通过上调BRD4表达诱导溶骨性炎性因子的产生[9]。但是，关于BRD4蛋白参与调控磨损颗粒诱导破骨细胞形成、活化和骨吸收功能的确切机制不明。本文对BRD4在磨损颗粒诱导破骨细胞形成和骨吸收功能中的作用进行研究。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    小鼠RAW264.7巨噬细胞购自中国科学院(上海)细胞库；DMEM高糖培养液和青霉素/链霉素混合液购自以色列BI公司；胎牛血清购自武汉普诺赛生命科学有限公司；Ti颗粒(平均直径为4 μm)购自美国Alfa Aesa；CCK8试剂盒和TRAP染色试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；Trizol试剂、反转录试剂盒和SYBR Green试剂盒购自日本TaKaRa公司；PCR引物购自生工生物工程(上海)股份有限公司；核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)购自美国R&D Systems；JQ1购自北京爱必信生物科技有限公司；骨吸收培养板购自美国康宁公司 ......