代振振,张义堡,崔伟豪,袁海峰,刘颖,徐宏伟

    (1 青岛大学医学部基础医学院,山东 青岛 266021； 2 上海交通大学医学院附属新华医院儿童骨科)

    近年来，随着人口老龄化及人们生活水平的提高，糖尿病的患病率逐年升高[1-2]。国际糖尿病联合会(IDF)的统计数据显示，2014年我国糖尿病病人达到9 629万，我国已成为全球糖尿病患病人数最多的国家，其中2型糖尿病占93.7%[3]。2型糖尿病发病机制复杂，至今仍未完全阐明。因此，建立理想的2型糖尿病动物模型，已经成为深入研究2型糖尿病发病机制、药物治疗、预防及其并发症转归等的重要途径和手段[4]。鼠类因具有经济易得、便于饲养等优势，成为制备糖尿病动物模型的优先选择。高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)或四氧嘧啶注射，是国内外学者建立2型糖尿病鼠类模型广泛采用的方法，但对于高脂饮食饲喂时间、STZ使用剂量等目前尚无统一的操作标准，这将对2型糖尿病的深入研究产生不利影响[5-6]。本研究采用高糖高脂饮食联合STZ腹腔注射方法建立2型糖尿病小鼠模型，并对模型建立影响因素进行系统观察。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    血清胰岛素酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒和STZ均购自北京Solarbio科技有限公司，肝糖原检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，柠檬酸和柠檬酸钠均为国产分析纯；高糖高脂饲料为自行配制(猪油10.0%，蔗糖20.0%，蛋黄粉15.0%，胆固醇1.2%，猪胆盐0.2%，鼠维持饲料53.6%，均为国产)；Accu-Chek Performa罗氏卓越血糖仪和血糖检测试纸(上海罗氏检测产品有限公司)，ELx 808型酶标仪(美国BioTek公司)，7600型全自动生化分析仪(日本日立公司)。

    1.2 10 g/L STZ溶液配制

    称取柠檬酸2.10 g，加入双蒸水100 mL中配成A液；称取柠檬酸钠2.94 g，加入双蒸水100 mL中配成B液。将A液与B液以1∶1混合制备柠檬酸缓冲液，调节pH值至4.2～4.4。称取1.0 g STZ，加入柠檬酸缓冲液至100 mL溶解。配好的溶液置冰上保存，在30 min内注射完毕。

    1.3 模型建立与分组

    取昆明种小鼠60只，体质量(26±2)g，购自山东鲁抗医药股份有限公司，动物合格证号为SCXK(鲁)20130001 ......