[摘要] 目的 探究有丝分裂激酶Aurora B对HeLa细胞染色体形态变化影响及其可能的作用机制。

    方法

    在HeLa细胞中加入二甲基乙酰胺(DMA)，观察染色体形态的变化；将HeLa细胞分为A、B组，分别加入DMSO和Aurora B激酶抑制剂处理，应用Western blot检测两组组蛋白H3 S10的磷酸化水平，利用免疫荧光技术、活细胞成像和细胞染色体分离实验检测两组细胞的染色体形态变化；在B组细胞处理的基础上加入磷酸酶抑制剂处理(C组)，利用免疫荧光技术检测磷酸酶对染色体形态变化的影响；使用小干扰RNA(siRNA)筛选Aurora B激酶的底物蛋白。

    结果 A组和B组细胞中组蛋白H3 S10磷酸化水平比较差异有显著性(t=23.58，Plt;0.05)。B组加入Aurora B激酶抑制剂处理30、60、90 min时染色体聚集细胞数量较A组显著增多，差异具有统计学意义(F=379.28～738.73，Plt;0.05)，抑制Aurora B激酶能够促进染色体的聚集。A组、B组、C组染色体聚集的细胞数量差异有显著性(F=969.20，Plt;0.05)，其中C组明显低于B组(t=22.41，Plt;0.05)。siRNA筛选结果显示，染色体上可能存在多种Aurora B激酶的底物蛋白影响染色体的形态变化。

    结论 有丝分裂激酶Aurora B通过磷酸化多种底物蛋白使染色体处于分散状态，而磷酸酶则发挥去磷酸化作用促进染色体的聚集，两者协同调控有丝分裂染色体的形态变化 ......