吴海梅,赵真真,周永,薛枫,辛永宁,宣世英

    (1 南京医科大学附属青岛市市立医院感染科,山东 青岛 266071; 2 南京医科大学附属青岛市市立医院临床研究中心;3 青岛市第六人民医院感染科)

    EB病毒(EBV)是疱疹病毒科嗜淋巴细胞属成员,感染了世界上95%以上的人口,且与多种自身免疫性疾病有关[1-3]。原发性胆汁性胆管炎(PBC)的发病机制尚不清楚,但该病本质上是自身免疫性疾病[4]。有研究发现,PBC与EBV感染之间存在关联[5-7]。EBV相关疾病的分布具有明显的地域差异,提示不同地区的EBV流行株可能有序列及生物学功能上的差异。EBV最常见的分型方式为基于EBV核抗原(EBNA)2、3A、3B及3C的抗原性及基因序列而区分的1/2分型。多数研究认为,1/2分型具有地域相关性,也有研究显示EBV-2型感染可能与鼻咽癌(NPC)发生有关[8]。而基于EBNA1的基因序列,亦可以将其划分为5种亚型:P-ala、P-thr、V-val、V-leu和V-pro。该分型方式同样具有疾病特异性[9]。本研究首次对PBC病人咽漱液中EBV进行1/2分型检测及EBNA1的多态性分析,旨在确定EBV的基因亚型与PBC疾病相关性。现将结果报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 标本采集及DNA提取

    收集青岛市市立医院及青岛市第六人民医院收治的54例PBC病人的咽漱液标本,病人籍贯均为山东省并且长期居住在青岛市。PBC诊断参照《原发性胆汁性胆管炎的诊断和治疗共识(2021)》的标准[10]。排除标准:①合并自身免疫性肝炎、原发性硬化性胆管炎、IgG4相关性肝胆疾病等其他自身免疫性肝病的病人;②合并甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等嗜肝性病毒感染,或人免疫缺陷病毒、巨细胞病毒等非嗜肝性病毒感染的病人。健康人群咽漱液标本均来自在山东省居住的健康成年人群。取30 mL无菌生理盐水漱口1 min后采样,标本采集后采用江苏康为世纪公司的通用式组织DNA抽提试剂盒抽提细胞DNA。

    1.2 EBV 1/2分型检测

    参考SAMPLE等[11]的报道设计PCR引物,扩增EBNA3C序列(表1)。取5 μL PCR扩增产物于含溴化乙锭的20 g/L琼脂糖凝胶中电泳,凝胶成像系统记录电泳结果 ......