游福蓉,杜占慧,宗丽娟,王勤拯,张成,邢泉生

    (青岛大学附属妇女儿童医院,山东 青岛 266034 1 心脏中心; 2 普外科)

    动脉粥样硬化(AS)是以脂质蓄积和炎症细胞浸润为主要特征的慢性炎症性过程,是冠心病、心肌梗死、脑卒中等众多心脑血管事件的病理基础[1-3]。AS发病机制复杂,与多种因素密切相关,其中内皮细胞功能障碍是AS发生发展的始动环节[4]。内皮细胞功能障碍有利于氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浸润至内皮下层,同时选择性招募单核细胞进入内皮下层转变为巨噬细胞,通过吞噬经理化修饰的脂蛋白形成泡沫细胞引发局部炎症反应,从而诱导AS的发生发展[3,5]。铁死亡是近年发现的一种铁依赖的新型细胞死亡方式,其特征是铁依赖的活性氧(ROS)和脂质过氧化物的蓄积、谷胱甘肽(GSH)的耗竭以及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的失活等[1-2]。多项研究结果表明,铁死亡是内皮细胞功能障碍的重要原因,在推动AS进展中发挥了重要作用[3-4]。白藜芦醇为一种天然植物多酚,主要存在于葡萄、花生、虎杖、大豆等多种植物中,具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒、延缓衰老等功效[6-7]。近年来研究发现,白藜芦醇可通过调节血脂水平、抗血小板聚集、抗炎、抑制低密度脂蛋白氧化修饰、抑制斑块内新生血管等作用发挥抗AS作用[8-10]。但有关白藜芦醇对血管内皮细胞铁死亡的影响尚未见报道。因此,本研究利用铁死亡诱导剂ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)铁死亡模型,探讨白藜芦醇对血管内皮细胞铁死亡的影响及机制,从而为明确中医药治疗AS疾病作用机制提供新的科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料

    HUVECs购自武汉普诺赛生命科技有限公司;内皮细胞培养液购自美国Sciencell公司;ox-LDL购自美国默克公司;白藜芦醇,分子式为C14H12O3,分子量228.24,纯度99.94%,购自美国MedChemExpress公司;ROS检测试剂盒购自中国白鲨生物有限公司;亚铁离子(Fe2+)检测试剂盒购自中国赛默飞世尔公司;GSH及丙二醛(MDA)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所;CCK-8溶液购自武汉Proteintech公司;兔抗GPX4以及鼠抗β-肌动蛋白(β-actin)单克隆抗体购自英国Abcam公司;兔抗铁蛋白重链(FTH1)单克隆抗体购自Abmart公司;兔抗溶质载体家族7成员11(SLC7A11)单克隆抗体、山羊抗兔lgG-HRP及山羊抗鼠lgG-HRP二抗购自美国Proteintech公司 ......