胡黄连苷Ⅱ对oxLDL诱导血管内皮细胞损伤影响





[摘要]目的探讨胡黄连苷Ⅱ(PⅡ)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及其机制。方法将EVC304细胞分为对照组,oxLDL组,PⅡ低、中、高剂量组,mimicNC组,miR1013p mimic组。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR1013p和基质金属蛋白酶15([STBX]MMP15)的关系;实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测细胞中miR1013p表达;MTT法、划痕实验、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;ELISA试剂盒检测细胞中白细胞介素6(IL6)、白细胞介素1β(IL1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)及MMP15蛋白的表达水平。结果MMP15为miR1013p靶基因。与对照组比较,oxLDL组miR1013p、IL6、IL1β、TNFα、MDA、Bax表达水平以及细胞凋亡率、LDH释放率均显著升高(F=100.7~526.1,Plt;0.05),细胞增殖能力、划痕愈合率、细胞侵袭数目、GSHPx活性以及PCNA、Bcl2、MMP15蛋白表达水平显著降低(F=93.0~260.6,Plt;0.05)。与oxLDL组比较,PⅡ低、中、高剂量组miR1013p、IL6、IL1β、TNFα、MDA、Bax表达水平以及细胞凋亡率、LDH释放率均显著降低(Plt;0.05) ......
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