5-羟色胺受体和转运体在正常和妊娠期糖尿病孕妇胎盘的表达及意义
赵晓玲,梁晓霞(山西省中医院,山西 太原 030012)
5-羟色胺受体和转运体在正常和妊娠期糖尿病孕妇胎盘的表达及意义
赵晓玲,梁晓霞
(山西省中医院,山西 太原030012)
[摘要]目的:检测5-羟色胺受体(5-HT(2A)R)和转运体(SERT)在正常孕妇和妊娠期糖尿病孕妇胎盘中的表达并探讨其在妊娠期糖尿病发生中的意义。方法:使用免疫印迹法检测46例妊娠期糖尿病孕妇胎盘和39例同期分娩的正常孕妇胎盘中5-HT(2A)R和SERT蛋白的表达。结果:妊娠期糖尿病组的孕前体重指数高于对照组,差异有统计学意(P0.05)。两组孕妇均排除了孕前糖尿病史,妊娠期糖尿病诊断标准参考第7版妇产科学[3]。
1.2主要试剂
多克隆抗体5-HT2AR和SERT购自美国Cruz公司,内参GAPDH购自KANGCHEN公司。二抗通用型polymer Kit购自北京中杉金桥公司。
1.3检测方法
采用免疫印迹法(western blot)对入组孕妇的胎盘进行检测。同为蛋白水平的检测,免疫印迹法比免疫组织化学法更容易定量。首先从组织中提取蛋白,称取150 mg组织绞碎,按1∶5加入WIP组织裂解液(北京博奥森公司),匀浆至液体浑浊,4℃ 1 500转/min离心10 min,取上清液。以每个电泳道15 μg蛋白量加入十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE),电泳完毕后将凝胶上的蛋白转移到硝酸纤维素膜上。转膜结束后用5%胎牛血清封闭硝酸纤维膜,1 h后弃封闭液加入一抗(分别为鼠抗人5-HT2AR多克隆抗体(1∶50),鼠抗人SERT多克隆抗体(1∶50),4℃过夜 ......
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