温 瑞， 李黎明，孙 洁，孔维宾

    (开封市疾病预防控制中心，河南 开封 475000)

    应用Taq Man荧光定量PCR技术建立HIV前病毒检测方法

    温 瑞， 李黎明，孙 洁，孔维宾

    (开封市疾病预防控制中心，河南 开封 475000)

    目的：使用荧光定量方法PCR对HIV前病毒进行检测，并建立相应预防机制。方法：对8E5细胞实施培育，然后收集并计数，将其核酸进行提取，并通过荧光定量来对HIV前病毒的逆转录基因片段实施扩增。 结果：通过实时PCR技术对HIV前病毒实施荧光定量检测，可达1拷贝的灵敏度，并取得较为稳定的扩增效果。 结论：利用PCR技术能够做到系统检测HIV前病毒，有利于日后对潜伏感染细胞的鉴定筛选以及对抗HIV治疗的及时反馈。

    HIV前病毒；PCR技术；荧光定量

    HIV作为最受关注的双链RNA逆转录病毒，主要感染具有CD4+表面标志的细胞，其中CD4+T细胞群是HIV攻击的主要靶细胞。CD4+T细胞活化后内部的HIV病毒的核酸嵌合细胞染色体，并逆转录RNA、剪切基因片段和翻译，在完成这一系列过程后会释放相当数量的病毒颗粒在细胞组织间，而本身的宿主细胞往往会因此死亡。但一部分的CD4+T细胞感染HIV病毒程度较轻，所产生的病毒颗粒数量极少甚至不产生，T细胞核内却嵌合(非嵌合形式也占相当数量)HIV前病毒的基因物质，从而导致潜伏性感染情况的发生[1]。HIV病毒以上述细胞为其屏障和滋生的病毒库，形成繁殖循环在适宜环境下再次复制相当数量的病毒 ......