贾辰乐,史克骏，南 杰，张 蕾

    (山西省肿瘤医院，山西 太原 030013)

    我国头颈部肿瘤的年发病率为15.22/10万,占全身恶性肿瘤的4.45%，而且近年来发病率呈现明显的升高趋势，严重威胁着人类健康。头颈部肿瘤类型多，以甲状腺癌发病率最高。虽然经过了几十年的不断努力，诊疗手段已有显著的提高，但甲状腺癌的生存率没有明显提高。在现有的手术、放化疗等传统治疗方式之外，寻找新的治疗方法是当前研究的热点。

    过继免疫细胞治疗作为一种副作用小的新型疗法近些年来受到科学界广泛关注。比如细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)，树突状细胞(DCs)，自然杀伤细胞(NK)，抗原嵌合受体T细胞(CAR-T)等[1]。这些细胞在体内外均证实有较强的抗肿瘤效应，但由于杀伤效率低，培养成本较高而受到一定的限制。γδT细胞是构成机体固有免疫的一种重要细胞，特别在早期抗癌阶段具有重要的作用，其抗原识别是非主要组织相容性复合体(MHC)限制性的，不依赖抗原的处理和呈递过程，对肿瘤抗原的识别具有广谱性特点[2-4]。虽然有报告证实其具有一定的杀肿瘤效应，但它的体内外杀伤活性研究报告相对较少[5]。在本研究选用甲状腺癌肿瘤细胞作为靶细胞，研究γδT细胞的杀伤作用，为γδT细胞作为过继细胞免疫治疗应用于临床提供前期研究基础。

    1 资料与方法

    1.1 试剂与仪器

    PE标记CD8、CD56、CD25、TCR-γδ的鼠抗人McAb及FITC标记的CD4、HLA-DR、TCR-αβ的鼠抗人McAb均购自BD PharMingen公司；MTT检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；人外周血淋巴细胞分离液购自GE公司；注射用重组人白介素-2(IL-2)购自北京双鹭药业股份有限公司；唑来膦酸(天晴依泰)购自正大天晴药业集团股份有限公司；RPMI1640培养液、胰酶为Gibco公司产品；流式细胞仪为美国BECKMAN公司(FC500)；SW579细胞由中科院生物物理所惠赠 ......