喻皇飞，方 宁，章 涛，陈代雄，范振海，杨卫兵，宫黎明，刘金伟，余丽梅

    (1.遵义医学院附属医院 贵州省细胞工程重点实验室，贵州遵义563003；2.肿瘤医院，贵州遵义563003)

    细胞过继免疫治疗是将体外诱导的具有强大杀瘤活性的免疫细胞回输给患者的一种生物治疗方法，其不仅具有杀伤体内残存癌细胞的能力，同时可增强宿主的免疫力，已成为肿瘤生物治疗的重要手段之一。细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer，CIK)细胞通常是将人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNCs)在体外经多种细胞因子共同培养刺激后所获得的一类异质细胞群，其主要表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，兼有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和非主要组织相容性复合物(MHC)限制性杀瘤的特点[1]，因此，CIK细胞被认为是目前抗肿瘤细胞过继免疫治疗的首选方案[2]。本研究采集、分离恶性肿瘤患者PBMNCs，体外诱导培养CIK细胞，并监测了诱导前后细胞的形态学变化及免疫表型变化。

    1 临床资料

    42例恶性肿瘤患者，其中呼吸道肿瘤19例，消化道肿瘤10例，泌尿系肿瘤8例，妇科肿瘤4例，黑色素瘤1例，为我院肿瘤医院住院病人，男性32例，女性10例，年龄38~80岁，平均年龄57岁，经病理检查后诊断明确，均为化放疗后中晚期恶性肿瘤患者。经医院伦理委员会批准，患者知情同意后，采集PBMNCs。

    2 材料与方法

    2.1 主要试剂 BTN无血清培养基(北京博特纳生物科技有限公司)；淋巴细胞分离液(天津太平洋科技有限公司)；重组人白细胞介素2(rhIL-2)(山东泉港药业有限公司)；重组干扰素(-IFN)(上海克隆生物高技术有限公司)；抗人T细胞CD3单抗(武汉生物制品研究所)；抗人CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-APC、CD56-FITC抗体及其同型对照均为美国BD公司产品 ......