皮质酮促进大鼠脊髓背角星形胶质细胞糖皮质激素受体表达
1材料与方法,2结果,3讨论
肖菊平,田 虹,曾俊伟,肖 智,刘晓红(遵义医学院 生理学教研室, 贵州 遵义 563099)
皮质酮促进大鼠脊髓背角星形胶质细胞糖皮质激素受体表达
肖菊平,田 虹,曾俊伟,肖 智,刘晓红
(遵义医学院 生理学教研室, 贵州 遵义 563099)
目的观察皮质酮(CORT)对培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法培养纯化新生SD大鼠脊髓背角星形胶质细胞,免疫荧光标记、免疫印迹技术检测星形胶质细胞GR表达的变化。结果培养的脊髓背角星形胶质细胞均表达GR,CORT可升高星形胶质细胞GR表达。结论药理剂量的CORT可促进脊髓背角星形胶质细胞GR表达。
皮质酮;糖皮质激素受体;脊髓;星形胶质细胞
糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)具有抗炎、抑制免疫反应和膜稳定等作用。近年的研究显示,GC在伤害性信息的传递及病理性疼痛时中枢痛敏的形成发展中也起着重要的作用【1-4】。外周神经损伤时,脊髓背角糖皮质激素受体(glucocorticoid reccptor,GR)表达增加,且GR表达与热痛敏和机械痛敏的发展在时间上呈现一致性,鞘内给予GR拮抗剂可明显减轻神经痛症状,表明中枢GR表达促进了病理性神经痛的发生和发展【2,5】。
脊髓背角是机体对伤害性信息进行调制和整合的重要位点。新近研究结果表明,脊髓背角星形胶质细胞在病理性疼痛的发生与维持中起着关键作用。在外周神经损伤模型、外周炎性疼痛以及癌痛模型中,均有不同程度的脊髓背角星形胶质细胞活化, 同时伴有胞外K+和Glu浓度升高、脊髓背角感觉神经元兴奋性升高【6,7】。神经系统几乎所有星形胶质细胞均有GR表达,脊髓星形胶质细胞也存在GR表达【8】。近年诸多实验证实GR参与了星形胶质细胞活性调节,通过抑制或增强星形胶质细胞活性而参与不同的生理和病理过程【9-11】。然而,影响星形胶质细胞GR表达的因素并不十分清楚。在伤害性刺激等应急状态下,机体GC分泌显著增加,高浓度的GC是否会影响脊髓背角星形胶质细胞GR表达及活性,尚未见报道。本研究采用免疫荧光多重显色及免疫印迹技术,观察到培养的脊髓背角星形胶质细胞均有GR表达,皮质酮(corticosterone,CORT)可导致星形胶质GR表达升高。
1 材料与方法
1.1 主要试剂和器材 1~3 d SD乳鼠,由重庆第三军医大学实验动物中心提供的成年大鼠 【许可证号SCXK(渝) 2007-0005】 所生;DMEM/F12培养基、胎牛血清和胰蛋白酶为Hyclone 产品;兔源GR抗体、小鼠源胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 抗体为美国Santa 公司产品;CORT为美国Sigma公司产品;激光扫描共聚焦显微镜 (德国 Leica TCS SP2);DU-600紫外分光光度计(Beckman ......
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