程青格,徐 平,龚其海,史艳红,刘 赛,黄艺婧

    (1.遵义医学院附属医院 神经内科；2.遵义医学院 药理学教研室,贵州 遵义 563099)

    反式白藜芦醇对Aβ25-35致痴呆大鼠海马caspase12的影响

    程青格1,徐 平1,龚其海2,史艳红1,刘 赛1,黄艺婧1

    (1.遵义医学院附属医院 神经内科；2.遵义医学院 药理学教研室,贵州 遵义 563099)

    目的观察反式白藜芦醇(TR)对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致痴呆大鼠海马caspase12 mRNA和蛋白表达的影响，补充说明TR抗痴呆的作用机制。方法大鼠随机分为五组：假手术组、阳性对照组、模型组、低剂量组、高剂量组，每组9只。在大鼠海马给予Aβ25-35造模结束后连续灌胃15 d每日1次，阳性对照组给予多奈哌齐1mg/kg，低剂量给予TR10mg/kg，高剂量TR40mg/kg，假手术组和模型组给予同体积的生理盐水。第15天时处死大鼠，免疫组化及Western blot 检测海马caspase12蛋白表达，实时定量PCR检测海马caspase12 mRNA的表达。结果大鼠注射Aβ25-35后，模型组海马caspase12 蛋白和mRNA表达明显高于假手术组(P1 材料与方法

    1.1 实验动物、主要试剂及仪器 清洁级SD雄性大鼠，体重300～350 g，由第三军医大学大坪医院医学院实验动物中心野战外科研究所提供，许可证号sexk(渝)2007-0005。Aβ25-35(Sigma公司)，反式白藜芦醇(纯度98%，陕西慈缘生物技术有限公司)， 盐酸多奈哌齐(安理申)【卫材(中国)药业有限公司制造，批准文号：国药准字H20070181】。BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物技术研究所)，caspase12多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)。SABC试剂盒兔抗IgG(武汉博士德生物工程有限公司),β-actin小鼠单克隆抗体(碧云天生物技术研究所)。Caspase12引物由大连宝生物公司合成，见表1。实时荧光定量PCR仪(美国BIO-RAD公司)，逆转录仪(德国Eppendorf公司)，脑立体定位仪(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，电泳凝胶成像分析系统(美国BIO-RAD公司)，Leica Owin细胞图像分析系统(德国leica)。 ......