遵义杜仲叶绿原酸提取工艺的优化研究
叶中,1实验部分,2讨论
肖 苑,李文娜,黄燮南,陈 阳(遵义医学院珠海校区,广东 珠海 519041)
遵义杜仲叶绿原酸提取工艺的优化研究
肖 苑,李文娜,黄燮南,陈 阳
(遵义医学院珠海校区,广东 珠海 519041)
目的优化杜仲叶中绿原酸的提取工艺。方法以绿原酸提取率为指标,通过单因素和正交实验优选提取方法与工艺参数。结果当乙醇浓度为60%、料液比为1∶12、pH=5、提取时间为30 min时,在超声频率25kHz的条件下提取2次,绿原酸的得率为2.54%,较用其他各组参数提取的得率高。结论杜仲叶中绿原酸的最佳超声提取工艺为:以60%乙醇为溶剂、料液比为1∶12、pH=5,提取时间30 min。
杜仲叶;绿原酸;提取工艺
杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)是我国常用的中药材之一,对杜仲的深入研究具有广泛的应用前景。已知杜仲叶与杜仲皮的化学成分,特别是药效成分基本一致【1】。因杜仲叶适当采收后可再发新叶,就实现资源的可循环利用而言,对杜仲叶中药物成分的研究、优化提取工艺、提高有效成分得率,具有十分重要的实际意义。绿原酸(chlorogenic acid)是杜仲叶中苯丙素类化合物的主要有效成分之一,具有抗氧化、保护心血管、抑制突变、抗菌抗病毒及抗肿瘤等作用【2】。为提高其开发利用价值,本文以贵州遵义产杜仲叶为原料,采用正交试验,对绿原酸的提取工艺进行了优化。
1 实验部分
1.1 仪器与试药 UV-2550紫外分光检测器(日本岛津); HS3120型超声波清洗机(天津恒高有限公司);HHW21-600型电热恒温水浴箱(北京长源实验设备厂); FZl02微型植物试样粉碎机(黄骅市中兴仪器有限公司); PHSJ-5型数显PH计(上海精密科学仪器有限公司); 722型可见分光光度计(上海现科分光仪器有限公司);杜仲叶(贵州省遵义市中药药材站);绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所);其他试剂均为分析纯。
1.2 方法与结果
1.2.1 杜仲叶预处理和溶液配制 称取一定量干燥粉碎的杜仲叶,按料液比2∶5加入氯仿浸泡2次,每次4 h,抽滤自然风干备用。另取杜仲叶粗粉1.0g按本实验最佳提取工艺提取绿原酸,过滤,定容至50 mL,即为样品液。精密称取绿原酸对照品10 mg,置15 mL具塞试管中,用50%甲醇溶解,定容即得对照品溶液。
1.2.2 最大吸收波长的确定【3】精密吸取50 μl对照品溶液点于条形层析纸上,用水-醋酸-正丁醇(5∶l∶4)混合后的上清液作展开剂 ......
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