李应林，李 宁，李 冉，田 昕

    (遵义医学院附属医院 附属肿瘤医院，贵州 遵义 563099)

    CIK对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP杀伤效应及耐药逆转作用

    李应林，李 宁，李 冉，田 昕

    (遵义医学院附属医院 附属肿瘤医院，贵州 遵义 563099)

    目的探讨CIK细胞对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP体外杀伤效应及逆转作用。方法用MTT法分别检测顺铂、CIK细胞、CIK联合顺铂对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的杀伤活性，计算耐药倍数，逆转倍数。结果①顺铂对人肺腺癌细胞A549及A549/DDP的50%杀伤浓度(IC50)分别为1.823g/mL、6.392 g/mL，差异有统计学意义(P0.05)。③不同浓度的CIK细胞(1×105,2×105and3×105个/mL)与人肺腺癌细胞共培养后，再加顺铂，其IC50值分别降至1.743g/mL、1.336g/mL、0.883g/mL，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 CIK细胞的制备 取健康人外周血单个核细胞，经IFN-γ，IL-2，抗CD3单抗等联合诱导CIK细胞。

    1.2 细胞培养 人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP用含10%胎牛血清的培养液，置37oC，5%CO2培养箱中培养。2～3 d换液。待细胞生长铺满80%培养瓶底时，胰酶传代，取指数生长期细胞进行实验。

    1.3 实验分组 将人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP分为单纯细胞培养对照组、单独顺铂组、单独CIK组、CIK联合顺铂组。

    1.4 MTT法分别检测顺铂的杀伤活性、CIK杀伤活性、CIK联合顺铂的杀伤活性。

    1.4.1 MTT法检测顺铂对人肺腺癌细胞A549和肺癌耐顺铂细胞A549/DDP的杀伤作用 将人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP制成(2×104个细胞/mL)细胞悬液 ......