龙 艳，王达利，魏在荣，郭常敏

    (遵义医学院附属医院 烧伤整形外科，贵州 遵义 563099)

    增生性瘢痕不同时期成纤维细胞体外诱导分化的初步研究

    龙 艳，王达利，魏在荣，郭常敏

    (遵义医学院附属医院 烧伤整形外科，贵州 遵义 563099)

    目的体外分离培养人肉芽组织、1年及2年增生性瘢痕不同时期的成纤维细胞，探讨其成骨、成脂、成软骨分化潜能，为创面修复治疗提供新的供体细胞来源。方法采用机械法结合酶消化法分离培养肉芽组织、1年及2年增生性瘢痕成纤维细胞，倒置相差显微镜下观察细胞形态及增殖情况，并绘制成纤维细胞的生长曲线。免疫细胞化学法检测Vimentin和CK19的表达。通过向成骨、成脂、成软骨细胞诱导分化鉴定多向分化潜能。结果成纤维细胞主要以长梭形为主，呈放射状、旋涡状生长；肉芽组织成纤维细胞增殖活力最强。三种来源的成纤维细胞均表达Vimentin，不表达CK19，经诱导可向骨、脂肪、软骨细胞方向分化。结论人肉芽组织到增生性瘢痕不同时期的成纤维细胞具有多向分化潜能，可作为创面修复治疗及组织工程研究的理想供体细胞。

    增生性瘢痕；肉芽组织；成纤维细胞；诱导分化

    增生性瘢痕是皮肤创伤后过度愈合的一种必然的不良结果，可引起受累部位外形损毁和不同程度的功能障碍，一直是整形外科领域研究的热点之一。成纤维细胞(fibroblasts，FB)是创伤愈合的主要修复细胞[1]，参与了创伤愈合的全过程，其生物学行为直接决定着创面愈合的质量与结果[2]。Lekic 等[3]将成纤维细胞比作损伤组织修复的工程师、建筑者和管理员。近来有研究表明成纤维细胞可能是间充质干细胞的“新外衣”，表现出间充质干细胞的生物学特性[4]。也有研究表明真皮来源的成纤维细胞可以向骨、脂肪、软骨等多种组织细胞分化[5]。本实验选取从肉芽组织到增生性瘢痕不同时期的成纤维细胞作为研究对象，对其进行免疫学鉴定及成骨、成脂、成软骨细胞方向诱导分化，探讨不同来源成纤维细胞的诱导分化潜力及其作为创面修复和组织工程供体细胞的可能性。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源及制备 所有实验样品取自遵义医学院附属医院烧伤整形外科住院患者，并经患者及家属知情同意。人创面肉芽组织标本取自深度烧伤患者第14天的创面，年龄25岁，创面局部无感染，无全身其它器质性病变。1年及2年增生性瘢痕患者，年龄20～30岁，均为初次就诊，未接受过任何治疗，无全身其它器质性疾病，以手术治疗瘢痕病变，切取废弃瘢痕组织置于L-DMEM培养基(含青霉素100 U/mL ......