曾俊伟,程年群,田 虹,刘晓红

    (遵义医学院生理学教研室暨贵州省麻醉与器官功能保护重点实验室,贵州 遵义 563099)

    ·基础医学研究·

    鞘内注射AM1241对慢性坐骨神经结扎大鼠热痛阈的影响

    曾俊伟,程年群,田 虹,刘晓红

    (遵义医学院生理学教研室暨贵州省麻醉与器官功能保护重点实验室,贵州 遵义 563099)

    目的观察鞘内注射大麻素CB2受体激动剂AM1241对慢性坐骨神经结扎(CCI)大鼠热痛阈和Iba1表达的影响, 探讨CB2受体在大鼠神经病理性疼痛中的作用。方法成年SD大鼠24只，随机分：sham组(假手术组)、CCI组(坐骨神经结扎+鞘内注射生理盐水)、 AM 1241处理组(慢性坐骨神经结扎+鞘内注射AM 1241 10-3M)；连续14 d鞘内注射，在术后第1，3，5，7，10，14天测定给药0.5 h后热缩足潜伏期(TWL)。在第7，14天免疫组化观察背角Iba1表达变化。结果大鼠CCI术后1 d即可形成稳定的热痛敏；与sham组相比，CCI组第7，14天背角Iba1表达明显上调(P1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 健康成年雄性SD大鼠24只，200～250 g，购自第三军医大学实验动物中心[许可证号SCXK(渝) 2007-0005]。大鼠随机分：假手术组、CCI组(坐骨神经结扎+鞘内注射生理盐水)、AM 1241处理组(慢性坐骨神经结扎+鞘内注射AM 124110-3M)；假手术组大鼠仅暴露坐骨神经不进行结扎。其余大鼠在鞘内置管5d后进行坐骨神经结扎，术后分别鞘内注射生理盐水，AM1241(10-3M，20 μL)。

    1.2 主要药品和仪器 AM 1241购自Sigma, 使用前溶于5% DMSO盐溶液中；山羊Iba1抗体购自abcam；抗体稀释液、山羊免疫组化试剂盒及DAB试剂盒均来自北京中山金桥公司；多聚甲醛，成都科龙华工试剂厂；PE-10导管来自美国健康医疗仪器国际公司；TF2一光热测痛仪为中国医学科学院药物研究所研制。

    1.3 鞘内置管及CCI模型制作 大鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠3 mL/kg，麻醉后取俯卧位, 在腰3～4间隙作长约3 cm 的皮肤纵切口，切开该处背棘肌的后筋膜, 切除腰4棘突和邻近椎板, 暴露腰4 与腰3棘突间隙，以25G针穿破黄韧带及硬脊膜，可见清亮的脑脊液溢出。经破口处插入PE-10导管2 cm，18G硬膜外穿刺针在大鼠皮下穿一隧道，将导管的另一端送至颈背部，外露2 cm固定 ......