谭 心，王 和，苑天红，马 妍

    (1.贵州省遵义市第一人民医院检验科，贵州遵义 563002;2.贵阳医学院生物学教研室，贵州贵阳 550004)

    近年来，随着抗菌药物、免疫抑制剂和激素在临床上大量应用，真菌感染率持续升高，其中白念珠菌是院内感染的主要致病菌之一[1-2]。氟康唑是目前国内治疗白念珠菌感染的常用药物之一，由于在临床上长期应用，耐药菌株不断产生，白念珠菌对氟康唑的耐药问题日渐凸显[3]。研究表明，中药中大量结构新颖、药理活性强的化合物，在抗真菌感染中具有一定的优势[4-5]。目前，联合应用抗真菌药物来避免耐药性产生和减少药物副作用是治疗真菌感染的研究方向之一[6]。本研究将通过探讨肉桂醛、盐酸小檗碱和氟康唑单独及其联合抗白念珠菌的作用及其机制，为临床上应用中药及中、西药物联合治疗白念珠菌感染提供初步试验依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和器材 白念珠菌(ATCC10231)，二甲基亚砜(北京，索莱宝科技有限公司)，RNA-pure Yeast Kit酵母RNA提取试剂盒(北京，康为世纪生物科技有限公司)，RNA逆转录和扩增试剂盒(大连，宝生物工程有限公司)，扩增引物(上海，生工生物工程有限公司)，肉桂醛、盐酸小檗碱(陕西，慈缘生物技术有限公司，批号 CY111220和CY111215);氟康唑(江西，回音必集团东亚制药有限公司，批号:2011041122)。

    1.2 方法

    1.2.1 药液配制 将肉桂醛(Cinnamic aldehyde，CIN)、盐酸小檗碱(Berberine Hydrochloride，BER)用二甲基亚砜(DMSO)分别溶解后得到母液的浓度为:12 800 μg/mL 和 25 600 μg/mL、氟康唑(Fluconazole，FLC)用三蒸水溶解后浓度为:1 280 μg/mL的母液，经0.22 μm滤器过滤，-20℃保存备用。

    1.2.2 菌液配置 取-80℃冻存的白念珠菌ATCC10231菌种100 μL菌液，滴于SDA培养基上，用涂玻棒，将菌液均匀铺于培养基。37℃恒温培养箱内10 min后，将培养皿倒置并继续培养24 h。连续画线接种于新培养基上，37℃培养24 h。直径>1 mm的菌落(5个单菌落)置于生理盐水中 ......