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编号:809559
NDRG1基因在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义
http://www.100md.com 2013年10月26日 遵义医科大学学报 2013年第3期
原位杂交,病理科,2结果,3讨论
     吴晓媚,林宇静,邓 飞,王海青,黄新爱

    (1.遵义医学院第五附属医院 病理科,广东 珠海 517100,2.中山大学附属第五医院 病理科, 广东 珠海 519100)

    ·临床医学研究·

    NDRG1基因在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

    吴晓媚1,林宇静2,邓 飞1,王海青1,黄新爱1

    (1.遵义医学院第五附属医院 病理科,广东 珠海 517100,2.中山大学附属第五医院 病理科, 广东 珠海 519100)

    目的观察NDRG1在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的表达情况,探讨其在SCC发生、发展中的意义。方法应用免疫组织化学染色和原位杂交技术检测NDRG1在30例SCC和10例正常皮肤中的表达。结果NDRG1蛋白及 NDRG1mRNA在SCC中呈强阳性或阳性表达,在正常皮肤中呈弱阳性或阴性表达。两者在SCC中的表达均明显高于正常皮肤,差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料 选取2006年至2010年本院病理科及中山大学附属第五医院病理科资料保存完整的30例SCC作为实验组,所有标本均经组织病理学明确诊断。其中男24例,女6例,年龄63±6.5岁。高分化鳞癌25例,中分化鳞癌4例,低分化鳞癌1例。头皮2例,面部14例,下肢7例,阴茎7例,患者术前均未进行放、化疗等治疗。另选择本院外科手术取下的正常皮肤组织10例作为对照组。

    1.2 主要试剂 浓缩型兔抗人NDRG1多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司;SP免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。NDRG1 mRNA寡核苷酸探针原位杂交试剂盒,购自武汉博士德生物工程有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 免疫组化 采用免疫组化SP法,实验步骤严格按产品说明书进行。浓缩型NDRG1抗体的工作浓度为1∶50,以鼠肾组织作阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照。

    1.3.2 原位杂交 实验步骤按原位杂交试剂盒说明书进行。每张切片滴加20 μL含NDRG1 mRNA寡核苷酸探针的杂交液,40 ℃杂交过夜。以鼠肾组织作阳性对照,以滴加不含探针的预杂交液作阴性对照 ......

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