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编号:809478
慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中树突状细胞的变化
http://www.100md.com 2013年10月27日 遵义医科大学学报 2013年第5期
定量,2结果,3讨论
     饶习敏,欧阳瑶,顾延会

    (遵义医学院附属医院 呼吸一科,贵州 遵义 563099)

    慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中树突状细胞的变化

    饶习敏,欧阳瑶,顾延会

    (遵义医学院附属医院 呼吸一科,贵州 遵义 563099)

    目的了解慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中的DCsmRNA表达变化。方法通过烟熏+脂多糖(LPS)方法建立COPD大鼠模型。HE染色观察气道及肺组织病理学的改变,同时用荧光定量RT-PCR检测CD86mRNA及OX-62mRNA在肺组织中的表达变化。结果COPD模型组大鼠肺组织HE染色符合慢性支气管炎及肺气肿的病理改变。与正常对照组相比,COPD模型组大鼠CD86mRNA及OX-62mRNA表达均增加(P1 材料与方法

    1.1 实验动物与标本采集 清洁级雄性Wistar大鼠24只,由重庆第三军医大学大坪医院实验动物中心提供,[合格证号为:SCXK(渝)2007-0005]。通过烟熏+脂多糖方法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病模型[2]。4周后取肺组织放入加有1 mLTrizol的EP管中,并立即放入-80 ℃冰箱保存,以备RNA提取。

    1.2 主要实验试剂及仪器 脂多糖 (E.coli 055:B5):美国Sigma公司产品,荧光定量RT-PCR试剂盒:大连TaKaRa公司,荧光定量RT-PCR引物(CD86、CD83、OX-62、β-actin) :大连TaKaRa公司,逆转录试剂盒:大连TaKaRa公司,ICycler iQ荧光定量PCR仪 :美国BIO-RAD公司。

    1.3 荧光定量RT-PCR

    1.3.1 cDNA的获取 采用Trizol一步法进行总RNA的提取 ......

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