小鼠原发性肝癌中胰岛素样生长因子2和H19的表达及意义
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文国容,金 海,徐尚福,杨 媛,计 蓓,周 姝,陈 萍,庹必光(1.遵义医学院附属医院 消化内科,贵州 遵义 563099; 2.遵义医学院 药理学教研室,贵州 遵义 563099;3.贵阳医学院肿瘤医院 药剂科,贵州 贵阳 550001)
小鼠原发性肝癌中胰岛素样生长因子2和H19的表达及意义
文国容1,金 海1,徐尚福2,杨 媛1,计 蓓1,周 姝1,陈 萍3,庹必光1
(1.遵义医学院附属医院 消化内科,贵州 遵义 563099; 2.遵义医学院 药理学教研室,贵州 遵义 563099;3.贵阳医学院肿瘤医院 药剂科,贵州 贵阳 550001)
目的观察IGF2、H19在原发性肝癌中的表达并了解其意义。方法建立原发性肝癌模型,模型建立后第20周处死小鼠取肝癌及癌旁组织储存于-80 ℃备用,另取正常小鼠肝脏作对照,用Real time RT-PCR方法检测IGF2、H19 mRNA的变化。结果与对照组比较,IGF2、H19在癌旁及癌组织中的表达都显著增加,在癌组织中增加更为显著P1 材料与方法
1.1 药品、试剂和仪器 二甲基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine, DEN)(Sigma 公司)、四氯化碳(天津市协和吴鹏色谱科技有限公司)、胰岛素样生长因子2 和 H19及内参β-actin引物(TaKaRa生物工程公司)、cDNA逆转录试剂盒及RNA扩增试剂盒(TaKaRa生物工程公司)、实时荧光定量PCR仪(美国 BIO-RAD公司)、全波段酶标仪(美国Thermo公司)。
1.2 实验动物 SPF级C57BL/6J雄鼠,4周龄,体重18~22 g,购自重庆第三军医大学大坪医院实验动物中心。动物许可证号:SCXK(渝)2012-0001。 自由饮水进食,动物房室温维持在23 ℃左右,适应性饲养一周后进行肝癌造模。
1.3 肝癌模型制备及取材 模型制备参考文献[1],取30只小鼠,每只小鼠一次性腹腔注射DEN (100 mg/kg),3 d后灌胃CCl4(橄榄油配制,浓度为20%),0.05 mL 10 g ......
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