何 亮,康亚辉,黄厚今,王忠明

    (1.遵义医学院公共卫生学院 毒理学教研室，贵州 遵义 563099; 2.江苏省连云港市第二人民医院暨蚌埠医学院附属连云港医院，江苏 连云港 222000)

    穿心莲内酯是天然植物穿心莲的主要有效成分，本品为二萜内酯类化合物，难溶于水，具有清热祛毒、免疫调节、保肝利胆、治疗心脑血管疾病、抗肿瘤、抗糖尿病及抗生育等作用[1]。穿心莲内酯在抗肿瘤方面已有研究显示，可显著抑制食管癌细胞Ec9706的增殖，并通过激活caspase3通路促使细胞凋亡[2]。另有研究证实，穿心莲内酯对乳腺癌细胞MCF-7、结肠癌细胞HCT-8和HCT-116及前列腺癌细胞PC-3均有明显体外增殖抑制作用[3]。不同分化结肠癌细胞对穿心莲内酯增殖敏感性未见报道，本研究通过MTT法明确穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖影响，以期揭示穿心莲内酯对不同分化结肠癌的作用，为临床用药提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 人结肠癌细胞Caco-2(高分化)、HT-29(中分化)和Lovo(未分化)，均购于美国ATCC；穿心莲内酯购自南京植朗公司(纯度>98%)，用二甲基亚砜(DMSO)溶解， 配制成100 mg/mL的溶液， -20 ℃保存备用；胰酶，DMEM培养基购自美国 Gibco 公司，加入青霉素和链霉素，使其浓度分别为100U/mL和100μg/mL；胎牛血清购于杭州四季青生物工程有限公司；噻唑蓝(MTT)、DMSO购自无锡海硕生物有限公司。

    1.2 细胞培养 将3种细胞分别培养于10%胎牛血清的DMEM完全培养基中， 置于37 ℃、5%CO2的培养箱中孵育, 2～3 d传代1次，取对数生长期细胞用于实验。

    1.3 MTT法 实验分为穿心莲内酯实验组、50 μg/mL 5-氟脲嘧啶(5-FU) 对照组、阴性对照组、0.2%DMSO对照组和空白对照组 ......