岳 欢，李 燕，高 婧，江 涛，黄俊琼

    (1.遵义医学院附属医院检验科/遵义医学院检验系，贵州 遵义 563099；2.四川省仁寿县疾病预防控制中心，四川 眉山 620500)

    趋化因子是一类小分子可溶性蛋白，能使免疫细胞发生定向趋化和迁移，在炎症反应和免疫应答中具有重要作用。哮喘疾病中炎性细胞的激活和浸润，释放趋化因子，调控其受体的表达，从而诱导炎性细胞迁移至支气管粘膜下激活靶细胞释放相关细胞因子，导致粘液分泌、气道高反应性等症状的发生。我们用SABioscience芯片，同时测定84个编码趋化因子及其受体的关键基因在哮喘小鼠模型的表达情况，为进一步研究其功能奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂 鸡卵白蛋白 (Ovalbumin, OVA)(Sigma公司)；Trizol，SuperScript III Reverse Transcriptase(Invitrogen公司，美国)；无RNA酶的糖原(Ambion公司)；RNeasy?MinEluteTM纯化试剂盒(Qiagen公司)；SABioscience趋化因子及其受体PCR芯片(PAMM-022Z，上海康成生物有限公司)。SPF级雌性C57BL/6小鼠,6～8周龄，体重18～22g,购于北京华阜康公司(SCXK(京)2009-0004)，饲养于遵义医学院医学实验中心SPF级动物房。

    1.2 方法

    1.2.1 哮喘模型的建立 16只小鼠随机分为哮喘组和对照组，每组8只。哮喘组在第1、7、14 d经腹腔注射OVA+氢氧化铝凝胶混悬液0.2 mL致敏，第21 d开始用5%OVA雾化激发，连续雾化7 d，每天30 min。对照组用PBS代替OVA。于末次雾化后24 h内，腹腔注射10%水合氯醛麻醉，腹动脉放血后取右肺组织，置于4%多聚甲醛中固定48 h，取左肺组织放于液氮中快速冻存提取总RNA。

    1.2.2 肺组织HE染色 肺组织于4%多聚甲醛中固定48h后，取出进行脱水，石蜡包埋，肺组织切片，HE染色。在显微镜下观察肺组织支气管黏膜嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等炎症细胞的浸润情况。

    1.2.3 肺组织RNA提取 取小鼠肺组织50～100mg ......