小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝脏CYP2E1表达的影响
空白对照,肝细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
李 晋,徐尚福,张晓洁,白国辉,罗 果(1.遵义医学院 医学与生物学研究中心,贵州 遵义 563099;2.遵义医学院 基础药理省部共建教育部重点实验室暨药理学教研室,贵州 遵义 563099)
肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的中间病理阶段,肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)的激活是肝纤维化发生的关键环节[1]。现认为在组织、细胞、分子水平上的主要促纤维化发生机制包括创伤愈合反应的慢性活化、氧化应激、上皮-间质相互作用的紊乱[2]。氧化应激本身即可活化HSC,促进肝纤维化形成。CYP2E1是肝脏药物代谢酶系细胞色素P450的重要亚型,与氧化应激(Oxidative Sress, OS)关系密切[3]。因此本研究通过观察小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝组织CYP2E1表达的影响,探讨小柴胡汤抗肝纤维化的可能机制。
1 材料与方法
1.1 主要材料 小柴胡颗粒(四川禾润制药有限公司,批号:110505);四氯化碳-分析纯(国药集团化学试剂北京有限公司);RNAiso plus、Power SYBR Green PCR Master Mix、Prime ScriptTMRT reagent Kit及Primer均购自TakaRa公司;兔抗大鼠CYP2E1多克隆抗体(bs-1725R,北京博奥森生物技术有限公司);免疫组化检测试剂盒(GK500705,基因科技上海有限公司)。
1.2 分组与给药 健康SD雄性大鼠(SPF级,合格证号:SCXK(渝)2007-0005),体重200±20g,适应性喂养1周后随机分为5组(每组10只),包括空白对照组(control),模型组(model),小柴胡汤低(XCHT(1g/kg))、中(XCHT(2g/kg))、高(XCHT(4g/kg))剂量组(小柴胡颗粒1 g=3.58g原生药)[4] ......
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