硫酸锌预处理对大鼠心脏缺血/再灌注损伤心肌超微结构的影响
心肌细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
张永国 ,侯伟波,王 颖,王海英,喻 田(遵义医学院 麻醉系,贵州 遵义 563099)
锌作为机体内重要的细胞内信号分子,在信号识别、第二信使代谢、蛋白激酶、激活磷酸化等方面发挥着重要作用[1]。体外循环下血锌下降及锌在机体内再分布都将加重再灌注期心肌损伤,而补充外源性锌可减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制尚未明确[2-3]。本实验通过建立Langendorff 离体心脏缺血再灌注模型,观察硫酸锌预处理对缺血/再灌注离体心脏超微结构及线粒体评分的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠40只,体重250~300g,8~9周龄,购于第三军医大学大坪医院实验动物中心(证书号:SCXK(渝)2013——0005)。
1.2 主要试剂 戊巴比妥钠(美国Sigma公司 ),肝素钠(北京Solarbio科技有限公司分装),硫酸锌(美国Sigma公司 ),实验所用灌流液为Krebs—Henseleit(K-H)液,其成分(单位mmol·L-1)NaC1 118.0,KC1 4.7,KH2PO41.2,MgSO41.2,NaHCO325.0,CaC121.25,Glucose 10.0。ST.Thomas停跳液(成分单位:mmol·L-1)NaC1 110.0,KC1 16.00, CaC121.20,MgCl216.00, NaHCO310.00。
1.3 主要仪器 Langendorff灌注装置、Powerlab生物信号采集系统,透射电子显微镜。
1.4 方法
1.4.1 实验分组与模型的建立 以随机数字表法将SD大鼠40只随机分为4组,每组10只,即正常组(N组)、缺血/再灌注组(C组)、硫酸锌预处理组(Zn组)、缺血预处理组(IPC)。硫酸锌预处理组采用3.6%硫酸锌,1.5 mL·kg-1予大鼠腹腔注射,其余各组采用三蒸水予大鼠腹腔注射(1.5 mL·kg-1)。24 h后,将大鼠麻醉(肝素250 U·kg-1、1%戊巴比妥钠40 mg·kg-1,腹腔注射)并且固定,迅速开胸取心脏置于K-H液中(4 ℃,pH值为7.35~7.45) ......
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