人胃癌HGC-27裸鼠皮下移植瘤模型的建立
悬液,无菌,1材料与方法,2结果,3讨论
靳俊峰,欧小波,阮 媛,郭瑞珍(遵义医学院珠海校区 病理学教研室, 广东 珠海 519041 )
基础医学研究
人胃癌HGC-27裸鼠皮下移植瘤模型的建立
靳俊峰,欧小波,阮 媛,郭瑞珍
(遵义医学院珠海校区 病理学教研室, 广东 珠海 519041 )
目的 建立人胃癌细胞株HGC-27裸小鼠皮下移植瘤模型,为胃癌的研究提供简单实用的载体。方法 培养HGC-27人胃癌细胞,达106~107个活细胞/瓶,以0.9%氯化钠无菌水溶液为溶剂制成单细胞悬液,随机注射到裸小鼠左腋下或右腋下,观察肿块的形成,并进行组织学观察。结果 注射后8 d触及米粒般大小的肿块,14 d可见肿块明显隆起。组织学观察癌细胞无腺体样结构形成,呈片状、巢状或条索状排列,细胞形状不规则,呈圆形、梭形或不规则形,核大深染,核质比增高,可见核分裂象。结论 人胃癌细胞株HGC-27裸小鼠皮下移植瘤模型的建立,操作简便,肿块表浅,可直接观测肿瘤,为进一步的研究能提供简单有效的模型。
胃癌;裸鼠;细胞株;移植瘤模型
胃癌是危害我国居民身体健康的常见消化系统恶性肿瘤,其发病率和死亡率居于所有恶性肿瘤的前列[1]。由于人的胃癌标本相对难以获得,受时间、空间、社会、伦理等诸多因素的限制,故动物实验就成为研究胃癌的重要手段之一。通过动物实验可以方便地获得大量实验材料,从而为下一步的实验提供有效的研究载体。胃癌动物模型的建立就成为开展研究的先决条件,目前,胃癌动物模型的建立方法主要有诱导致瘤法和移植瘤法[2],
其中皮下诱导致瘤法操作相对简便,因此本实验以裸小鼠的皮下诱导致瘤模型的建立为研究对象,为胃癌的基础和临床研究提供可靠实用的动物模型制作方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 胃癌细胞株 HGC-27人胃癌细胞,购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。
1.1.2 实验动物 BALB/c-nu/nu裸小鼠:购自北京华阜康生物科技股份有限公司,生产许可证号SCXK(京)2014-0004。雄性4~5周龄,体重16~18g。实验过程均在SPF屏障环境内饲养。实验前1周购入小鼠,使之适应新环境。
1.1.3 试剂 RPMI-1640培养基购自Gibco公司,胎牛血清购自Gibco公司。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养 人胃癌细胞HGC-27(见图1)转移至含10%胎牛血清的RPMI-1640细胞培养液中,在37 ℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养,待细胞铺满培养瓶底后,用0.25%胰蛋白酶消化液消化成单个细胞,继续传代 ......
您现在查看是摘要页,全文长 9607 字符。