马欢欢，张 超，郑淑文，朱昭琼，刘 进

    (1.遵义医学院 麻醉学系，贵州 遵义 563099；2.四川大学华西医院 麻醉科，四川 成都 610041)

    基础医学研究

    新生期大鼠重复吸入七氟烷对其成年期Aβ、Tau蛋白的影响

    马欢欢1，张 超1，郑淑文1，朱昭琼1，刘 进2

    (1.遵义医学院 麻醉学系，贵州 遵义 563099；2.四川大学华西医院 麻醉科，四川 成都 610041)

    目的 研究新生期大鼠间断、重复吸入七氟烷,对其成年期行为学及β淀粉样蛋白(Aβ)、异常磷酸化Tau蛋白(PHF-Tau)在海马CA1区的表达。方法 7日龄SD大鼠24只，随机分为3组(n=8)，1.5%七氟烷组(S1组)，2.6%七氟烷组(S2组),对照组(C组)。分别于出生7、14、21 d(P7、P14、P21)吸入1.5%、2.6%七氟烷及运载气体1 h，于P91～P95行定位航行和空间探索实验。水迷宫实验结束后，取海马组织，用免疫组织化学的方法测定CA1区Aβ、PHF-Tau蛋白的表达。结果 ①与C组相比，P94，S1组、S2组逃避潜伏期延长(P1 材料与方法

    1.1 动物与分组 7日龄SPF级SD大鼠24只，雌雄不拘，由重庆第三军医大学实验动物中心提供。[sexk(渝)2007-0005]。随机分为3组(n=8)，1.5%七氟烷组(S1组)，2.6%七氟烷组(S2组),对照组(C组)。环境温度21±2 ℃，湿度55%～65%，12 h光照与黑暗交替。哺乳期母乳喂养。

    1.2 药品、试剂与仪器 七氟烷(批号：65120301，鲁南贝特制药有限公司), Anti-beta antibody(批号：ab14220,abcam 公司，英国),Anti-Tau antibody(批号：ab3205,abcam 公司，英国)，GTVIsionⅢ鼠/兔通用二抗检测系统，Morris 水迷宫测试仪(成都泰盟科技有限公司)，气体监测仪(Dragra,德国)、自制吸入麻醉箱。

    1.3 麻醉方法 将SD大鼠置于自制的循环密闭麻醉剂箱(78 cm×48 cm×15 cm)中,连接麻醉机，箱底铺一层(约2 cm)钠石灰，覆盖薄层纱布，每个实验日早上9∶00开始，按S1、S2及C组分别于P7、P14、P21吸入 1.5%七氟烷、2.6%七氟烷、运载气体(1 L O2+ 1 L 空气/min)1 h，实验中持续监测进气孔、出气孔的七氟烷浓度以控制实验条件。吸入结束待大鼠完全苏醒后放回原笼饲养。

    1.4 行为学认知功能测试 ......