田 伟，顾 燕，邓胜利，张 琳

    (遵义医学院 麻醉学系暨贵州麻醉与器官保护基础研究重点实验室，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    UrocortinⅠ后处理对缺氧/复氧大鼠心肌线粒体膜电位的影响

    田 伟，顾 燕，邓胜利，张 琳

    (遵义医学院 麻醉学系暨贵州麻醉与器官保护基础研究重点实验室，贵州 遵义 563099)

    目的 探讨UrocortinⅠ后处理对缺氧/复氧后成年大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响。方法 利用离体心脏灌注装置(MPA)分离成年大鼠心肌细胞，培养24 h后进行细胞计数并随机分为正常组(N组)、缺氧/复氧组(I/R组)、UrocortinⅠ后处理组(UcnⅠ组)、5-羟葵酸拮抗UrocortinⅠ组(5-HD+UcnⅠ组)。N组在预设37 ℃培养箱中持续培养135 min；余3组均予缺氧40 min，复氧60 min建立缺氧/复氧模型。其中UcnⅠ组在缺氧末复氧前给予UcnⅠ处理30 min；5-HD+UcnⅠ组在UcnⅠ处理前给予特异性线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)拮抗剂5-HD处理5 min，余处理同UcnⅠ组。各组于复氧末加入JC-1荧光探针并用激光共聚焦显微镜观察心肌细胞膜电位的变化。结果 N组心肌细胞高膜电位比例均高于其余各组(P0.05)。结论 UcnⅠ后处理可防止缺氧/复氧后心肌细胞线粒体膜电位的下降，保护复氧后心肌线粒体的膜电位。

    UrocortinⅠ；后处理；缺氧/复氧；线粒体膜电位；心肌保护

    相关研究表明线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential MMP)与心肌缺血再灌注损伤(MIRI)时的细胞凋亡有关，而线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)的开放可抑制膜电位下降[1]。UrocortinⅠ(UcnⅠ)是一种内源性神经肽，研究发现其后处理可通过抑制线粒体凋亡通路的活化产生心肌保护[2]。但该保护作用是否与MMP变化有关及与mito-KATP 之间存在怎样的关系尚不清楚。本实验拟通过建立缺氧/复氧再灌注损伤模型，观察UcnⅠ后处理对心肌细胞线粒体膜电位的影响，探讨其发挥心肌保护作用的可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 SPF级成年健康雄性Sprague Dawley大鼠24只，体重250～300g(第三军医大学大坪医院实验动物中心，许可证号：SCXK(渝)2012-0005)；M199型培养基，层黏连蛋白，EGTA，Ⅱ型胶原酶，BSA ......