冯继红，冯冬冬，傅仲学

    (1.重庆医科大学附属第一医院 胃肠外科，重庆 400016；2.安徽省六安市寿县中医院 心内科，安徽 六安 232200)

    临床医学研究

    PRDX1通过上皮间质转化促进结肠癌SW480细胞侵袭转移

    冯继红1，冯冬冬2，傅仲学1

    (1.重庆医科大学附属第一医院 胃肠外科，重庆 400016；2.安徽省六安市寿县中医院 心内科，安徽 六安 232200)

    目的 探讨过氧化还原酶1 (Peroxiredoxin 1，PRDX1)在结肠癌上皮间质转化( epithelialmesenchymal transition，EMT) 发生中的作用及其参与结肠癌侵袭转移的可能机制。方法 通过慢病毒转染使结肠癌SW480细胞PRDX1过表达并通过Western blot检测验证；采用Transwell方法和细胞划痕实验检测细胞侵袭及转移能力的变化；免疫细胞荧光检测结肠癌SW480细胞EMT相关蛋白Twist1、E-cadherin及Vimentin的表达；Western blot方法检测EMT转录因子Twist1、EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Vimentin及转移相关蛋白MMP-9的表达。结果 转染PRDX1组SW480细胞中PRDX1呈过表达；Transwell法和细胞划痕实验显示过表达PRDX1组细胞的侵袭及转移能力较对照组明显增强；免疫细胞荧光显示转染PRDX1组细胞其上皮细胞标记E-cadherin明显下调，间质标记Vimentin及EMT转录因子Twist1表达明显上调；Western blot结果表明过表达PRDX1组E-cadherin较对照组显著降低(P1 材料与方法

    1.1 主要试剂与材料 人结肠癌细胞株SW480购自中科院上海细胞库，胎牛血清(FBS)购自Hyclone公司，L-15培养基(Leibovitz’s L-15 Medium)和嘌呤霉素(Puromycin)购自Gibco公司，兔抗人GAPDH单抗、兔抗人PRDX1单抗购自Epitomics公司，E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Twist1及MMP-9抗体购自Santa cruz公司，“SYBR?PrimeSciptTMRT-PCR Kit”购自中国大连宝生物工程有限公司，Lipofectamine2000购自Invitrogen公司，Premix Taq酶、DNA marker均购自TaKaRa公司，ECL发光试剂盒购自Millipore公司 ......