廖 鑫，张安星，高 琳，张 晗，阳 琰

    (贵州省遵义医学院附属医院内分泌科，贵州 遵义 563000)

    技术与方法

    二甲双胍对糖尿病非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏内脏脂肪素表达的作用

    廖 鑫1，张安星1，高 琳1，张 晗1，阳 琰1

    (贵州省遵义医学院附属医院内分泌科，贵州 遵义 563000)

    目的 观察二甲双胍对糖尿病合并非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏内脏脂肪素表达的影响。方法 雄性SD大鼠，分为正常对照(NC)组，肥胖组(OB组)，糖尿病(DM)组和二甲双胍(MET)组。所有大鼠均测FBG、TG、TC、HDL-C、LCL-C、FFA、FIns，计算HOMA-IR指数。采用RT-PCR测定肝脏内脂素 mRNA表达，Western blotting测定蛋白表达,H.E.染色后观察肝脏病理变化。结果 OB组及DM组FBG、TG、TC、HDL-C 、LCL-C、FFA、FIns、HOMA-IR均增高(P1 材料与方法

    1.1 实验动物、仪器与试剂

    雄性SD大鼠(SPF级)，体重185-220g，大鼠及喂养饲料均购买于第三军医大学附属大坪医院动物实验中心。老鼠房间室温保持于20-26 ℃之间，12小时光照，自由饮水。胰岛素放免试剂盒(美国LINCO公司)，链脲佐菌素(STZ)(美国sigma公司)；Visfatin抗体(美国Biovision公司)，Trizol Reagent、焦碳酸二乙酯、逆转录试剂盒、SYBR? GREEN PCRMaster Mix(大连宝生物公司)。visfatin及β-actin引物的设计、合成(大连宝生物公司)。β-actin抗体(北京中杉金桥公司)。RIPA蛋白裂解液、BCA蛋白浓度定量试剂盒、彩色预染marker及ECL显色试剂盒(碧云天生物技术有限公司)。盐酸二甲双胍(施贵宝制药公司)。

    1.2 模型的建立 雄性SD大鼠60，适应性喂养一周后，随机分为正常对照组(NC组)10只，普通饲料喂养；肥胖组(DIO组)，高糖高脂饲料喂养，以体重>A组平均体重的20%为肥胖组大鼠成模标准，10只成模。糖尿病模型组(DM组)，高糖高脂饲料喂养，给予腹腔注射链脲佐菌素(40 mg/kg)，以2次血糖≥16.7 mmol/L，做为糖尿病大鼠成模标准，共成模20只。糖尿病成模后，其中10只作为糖尿病组，另10只用盐酸二甲双胍100 mg/kg.d灌胃，作为二甲双胍组(MET)，将空腹血糖控制2 结果

    2.1 与NC组相比，DIO组及DM组FBG、TG、TC、LDL-C、FFA、FIns、HOMA-IR均增高(P ......