龙艳丽 ，胡 勇，余 舰，张丽娟，杨 阳

    (1.贵州省人民医院 病理科，贵州 贵阳 550002；2.遵义医学院附属医院 司法医学鉴定中心，贵州 遵义 563099；3.遵义医学院 法医学系，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    孕兔羊水栓塞补体C3a、凝血功能的研究

    龙艳丽1，胡 勇2，余 舰2，张丽娟3，杨 阳3

    (1.贵州省人民医院 病理科，贵州 贵阳 550002；2.遵义医学院附属医院 司法医学鉴定中心，贵州 遵义 563099；3.遵义医学院 法医学系，贵州 遵义 563099)

    目的 通过孕兔羊水栓塞动物模型测定凝血功能、补体C3a的含量以及补体C3a在肺组织中的表达，初步探索羊水栓塞(AFE)的发病机制。方法 健康妊娠晚期孕兔随机分3组(对照组、羊水组、羊水胎粪组)，暴露子宫抽取羊水、胎粪。按2.5 mL/Kg注入自体羊水、羊水胎粪混合液(羊水原液与胎粪按质量比配成1%混合液)入血，对照组注入等剂量生理盐水。注射30 min后取血分别用血凝仪测凝血功能(凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原 (FIB))及ELISA法测血浆补体C3a含量。取血后10%KCl处死孕兔，取孕兔双肺做病理学检查。结果 ①补体C3a浓度：羊水组、羊水胎粪组补体C3a含量降低(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康妊娠晚期家兔(购于重庆第三军医大学)体重4～5 kg，胎龄25～31 d。随机分为3组：正常组、羊水组、羊水胎粪组，每组各10只。

    1.2 仪器 LEICA-RMEB5石蜡切片机 (德国LEICA公司)、普通光学显微镜(日本OLYMPUS公司)、酶标仪(Biotek公司(型号ELX800))、血凝仪。

    1.3 试剂 补体C3a(兔抗人，北京博奥森公司)、CK(兔抗人，北京博奥森公司)、补体C3a ELISA试剂盒(昆明绿盟科技有限公司)。

    1.4 方法

    1.4.1 羊水、胎粪收集方法 孕兔术前12 h禁食，饮水任意，3%戊巴比妥钠1 mL/kg沿耳缘静脉注射麻醉，麻醉生效后仰卧位固定于兔台上，下腹正中切开，行子宫次全切除术后关腹。将切下的子宫用温盐水纱布覆盖，打开宫壁，暴露胎膜，20 mL注射器穿刺抽取羊水。打开胎兔腹壁，取出胎兔大肠，将胎粪轻轻挤压出来，用匀浆器磨碎，与自体羊水原液按质量比配成1%的羊水胎粪液。

    1.4.2 兔羊水栓塞模型的构建 羊水组、羊水胎粪组孕兔分别沿耳缘静脉按2.5 mL/kg自体注入已制备好的羊水、1%羊水胎粪液(羊水原液与胎粪按质量比配成1%混合液)注射液,对照组按2.5 mL/kg沿耳缘静脉注入生理盐水 ......