付少彬,文福来，闫 松，张 芸，李 义，岳昌武

    (1.遵义医学院 药学院，贵州 遵义 563099；2. 遵义医学院 医学与生物学研究中心暨贵州省特色微生物资源及药物开发重点实验室，贵州 遵义 563099)

    技术与方法

    微生物转化氧化槐定碱活性菌株的筛选

    付少彬1,文福来1，闫 松1，张 芸1，李 义1，岳昌武2

    (1.遵义医学院 药学院，贵州 遵义 563099；2. 遵义医学院 医学与生物学研究中心暨贵州省特色微生物资源及药物开发重点实验室，贵州 遵义 563099)

    目的 通过微生物转化方法对氧化槐定碱进行结构修饰和改造，以期得到结构新颖或活性更强的衍生物，从中筛选出对氧化槐定碱有催化活性的微生物菌株。方法 采用稀释法分离土壤微生物菌株，表面消毒法分离植物内生菌，通过薄层色谱法(TLC)对转化反应进行筛选；通过表型和基因型鉴定活性菌株。结果 从遵义医学院土壤分离得到土壤微生物菌株26株，从植物分离得到内生真菌60株；17株土壤微生物具有催化活性，其中菌株T003表现出强的选择性，经显微结构和16S rDNA 序列分析，鉴定其为Escherichiacoli。结论 微生物转化法为氧化槐定碱的结构修饰和改造提供了一个很好的选择方法。

    生物转化；生物碱；土壤微生物；选择性

    氧化槐定碱 (OSR) 和槐定碱 (SR) 是从豆科槐属植物苦豆子(SophoraalopecuroidesL)中提取到的重要的生物碱。 研究表明槐定碱在兴奋中枢神经系统、抗青霉素诱发的癫痫、免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等方面表现出显著的药理活性[1-4]。氧化槐定碱和槐定碱在化学结构上非常相似，其差别在于N(氮)原子，氧化槐定碱是槐定碱的氮氧化物形式，近年来关于氧化槐定碱的研究也受到越来越多的关注。多项研究表明氧化槐定碱显示出良好的镇痛、消炎、镇静、抗心律失常、免疫调节活性、保护脑缺血等药理活性[5-6]。

    氧化槐定碱由于环系稳定，所以可改造的位点较少，利用传统的有机催化的方式对该类化合物的化学活泼位点进行结构修饰有很大的局限性，对于不活泼的位点用传统的有机化学的方法进行修饰和改造相对较难，而微生物转化反应却可以催化非活泼的C-H或 N-H位点，其作为化学合成的有效补充正广泛应用于合成反应中，进而可以为新药研发提供更具价值的先导化合物[7-8]。此外，被称之为“绿色化学”的微生物转化法具有反应选择性强(区域选择性和立体选择性)、反应条件温和、副产物少、不造成环境污染和后处理简单等优点，所以近年来通过微生物转化方法对结构复杂的天然产物进行结构修饰研究受到越来越多的关注[9-10] ......