葛 斌，杨智敏，刁 英，杨名慧，宫黎明，石 燕

    (遵义医学院附属医院 生殖中心，贵州 遵义 563099)

    技术与方法

    D3卵裂期胚胎玻璃化冷冻技术在IVF实验室中的应用

    葛 斌，杨智敏，刁 英，杨名慧，宫黎明，石 燕

    (遵义医学院附属医院 生殖中心，贵州 遵义 563099)

    目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类卵裂期胚胎冻存中的应用价值。方法 回顾性分析本中心261个冷冻胚胎复苏周期，比较2种冷冻方法的胚胎存活率、完好率、妊娠率和种植率等数据。结果 玻璃化冷冻组的存活率(97.11%)、完好率(89.02%)和种植率(23.12%)显著高于程序化组(91.31%、63.73%、16.31%)(P0.05)。结论 玻璃化冷冻是卵裂期胚胎保存的优选方法。

    卵裂期胚胎；玻璃化更冷冻；程序化冷冻

    卵裂期胚胎冷冻是辅助生殖技术中不可缺少的重要组成部分，它可以使患者在一个超排降调周期内进行多次移植，增加单次助孕周期的总妊娠率并能有效避免胚胎过度浪费[1]。实验室传统的程序化冷冻(programmed freezing)要求精密昂贵的设备,且操作过程繁琐，对液氮的消耗大。近年来出现的玻璃化冷冻(vitrified cryopreservation)技术已经被越来越多的生殖中心采用。玻璃化冷冻技术是利

    用微小冷冻载体在极快速降温过程中使高浓度的冷冻液变成一种高粘度的介于液态与固态之间、非晶体、透明的玻璃态，达到冷冻保护的作用。与程序化冷冻相比，具有操作简单、耗时少、成本低等优点，但是否能得到理想的临床妊娠率和胚胎种植率，尚需要研讨。本研究回顾性分析本生殖中心261个复苏周期的各项实验室和临床指标，比较程序化冷冻和玻璃化冷冻对卵裂期胚胎的冷冻复苏效果。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 随机选取2014年2月至8月在遵义医学院附属医院生殖中心接受冻胚复苏移植(frozen thawed embryotransfer,FET)的患者261例645枚胚胎，根据冷冻方法不同分为两组：程序化冷冻复苏184个周期(472枚)，玻璃化冷冻复苏77周期(173枚)。

    1.2 试剂和方法

    1.2.1 胚胎冷冻 (1)程序化冷冻试剂实用Quinn′s冷冻培养基。冷冻方法：①脱水程序(室温下)：胚胎转移在溶液Ⅰ(HEPES-HTF+20%SPS)、溶液Ⅱ(0.5M PROH)、溶液Ⅲ(1.0M PROH)中各停留5 min,溶液Ⅳ(1.5M PROH)停留10 min ......