基础医学研究

    三种异喹啉型生物碱的微生物转化筛选

    付少彬1，龙书安1，张芸1，李义1，张茂生1，孟庆峰2

    (1.遵义医学院 药学院，贵州 遵义563099；2. 遵义医学院 公共卫生学院，贵州 遵义563099)

    [摘要]目的 异喹啉型生物碱是生物碱的重要组成部分，药用价值高，本文拟筛选对3种四氢异喹啉型生物碱Z1(巴马亭)、Z2(番荔枝宁)、Z3(瑞枯灵)具有催化活性的微生物菌株,为后期通过微生物催化方法进行3种生物碱的结构修饰提供依据。方法 以微生物菌株为酶催化剂，将作为底物的3种异喹啉型生物碱与18种微生物菌株共培养，3~5 d后乙酸乙酯萃取发酵液，通过薄层色谱法(TLC)对转化反应进行筛选；Z1和Z2两种底物转化能力均较强的菌株03-L-93-Ⅱ通过ITS区序列进行种属鉴定。结果 经筛选的8株真菌、10株细菌中，03-L-93-Ⅱ、T002、T009、T016、T017具有转化Z1(巴马亭)的能力，T002、T009、T017、03-L-93-Ⅱ具有转化Z2(番荔枝宁)的能力，菌株L125-4对Z3(瑞枯灵)表现出微弱的转化活性。对菌株03-L-93-Ⅱ经分子生物学方法鉴定为Xylariales. Sp。结论 微生物菌株作为催化剂对四氢异喹啉型生物碱进行结构改造是可行的。

    [关键词]生物转化；异喹啉型生物碱；菌株筛选；薄层色谱法(TLC)

    生物碱是一类十分重要的天然产物，也是一类研究最早的有生物活性的天然化合物。生物碱类化合物大多具有很好的生理活性，常常作为许多中草药及药用植物的有效成分。四氢异喹啉类生物碱是生物碱类成分的重要骨架类型，具有广泛的生物活性，包括抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗心律失常、抗血小板聚集、降压、调节免疫等功能[1]，某些四氢异喹啉类生物碱如盐酸小檗碱、延胡索乙素等已经在临床上得到广泛应用。随着人们对四氢异喹啉类生物碱研究的不断深入，此类生物碱生物活性和结构改造也受到人们广泛关注[2]。

    巴马亭(palmatine)，具有广谱抗菌作用，临床上可用于治疗妇科炎症、菌痢、肠炎、呼吸道和泌尿道感染、外科感染及结膜炎等[3]，此外还对蛙心有轻度兴奋作用、降压作用的报道[4-6]。番荔枝宁(xylopinine)，文献报道具有镇静、降压作用以及很强的抗疟活性[7-8]，并且还是合成其他异喹啉类生物碱的重要前体化合物。瑞枯灵(reticuline)，研究发现其具有较强的抗血小板聚集作用，可以抑制子宫平滑肌的收缩，具有中枢神经系统抑制等作用[9-11]。

    四氢异喹啉类生物碱因其独特的化学结构和良好的生物、药理活性 ......