吴贵英，祝 飞，沈 访，储士润，李 林，郑明辉

    (1.遵义医学院 第一临床学院，贵州 遵义 563099；2.遵义医学院 细胞生物学教研室，贵州 遵义 563099；3. 遵义医学院 寄生虫教研室，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    聚乙二醇诱导金钗石斛原生质体融合条件的初步探索*

    吴贵英1，祝飞1，沈访1，储士润2，李林2，郑明辉3

    (1.遵义医学院 第一临床学院，贵州 遵义563099；2.遵义医学院 细胞生物学教研室，贵州 遵义563099；3. 遵义医学院 寄生虫教研室，贵州 遵义563099)

    目的 在原生质体融合实验中筛选PEG分子量、工作浓度及孵育时间的最佳水平，为系统建立起金钗石斛原生质体融合技术体系奠定实验基础。方法 研究采用药用品质优良的贵州赤水金钗石斛与茎粗生长快的云南瑞丽金钗石斛原生质体为材料，采取单因素分析法，研究不同的聚乙二醇(PEG)分子量、浓度及孵育时间对原生质体融合率的影响。结果 PEG的分子量对原生质体融合率有显著的影响。当分子量为3 350 Da，原生质体融合率最高，为18.32%；PEG浓度为40%时，原生质体融合率最高，为18.81%；孵育时间为25 min时，原生质体融合率最高，为18.62%。结论 采用分子量为3 350 Da的PEG在浓度为40%的条件下孵育25 min时，获得的原生质体融合率最高，为18.81%。

    金钗石斛；原生质体；聚乙二醇；融合率

    金钗石斛(DendrobiumnobileLindl.)是我国传统名贵中药，为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物[1]。其性微寒，味甘，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热、目暗不明、萎缩性胃炎、浅表性胃炎、慢性结肠炎等病症，是石斛明目丸、石斛浸膏溶液、石斛清胃散等制剂的重要成分[2]。现代药理研究证实金钗石斛具有治疗白内障、增强肠蠕动、免疫调节、降血糖、抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳等作用[3-5]。此外，金钗石斛花姿优美，清香宜人，是著名的观赏花卉[6]。然而由于自身的生物学特性、生态环境的破坏、过度采挖等原因，金钗石斛野生资源日渐枯竭，已被我国列为二类珍稀濒危保护植物和珍稀濒危的中药品种，具有自然突变和优良中药性状的株系更是稀缺。因此，金钗石斛的遗传资源亟待开发利用和拓展，从拓展资源中筛选出药性成分高、中药性状好、产业化潜力大的株系，不仅有助于药性遗传品质的筛选、改良、基因工程等后续研究，还有望直接应用于生产实践，转化成经济产值。

    通过杂交和倍性育种方式 ......