韩 勇，郭立荣，贺 滟，刘万力，王 梅，赵红艳，何 娅

    (1.遵义医学院 基础医学院生理学教研室，贵州 遵义 563099；2. 遵义医学院 基础医学院形态学实验室，贵州 遵义 563099)

    基础医学研究

    20-HETE对大鼠心肌缺血再灌注损伤中NADPH氧化酶活性及ROS生成的影响*

    韩勇1，郭立荣2，贺滟1，刘万力1，王梅1，赵红艳1，何娅1

    (1.遵义医学院 基础医学院生理学教研室，贵州 遵义563099；2. 遵义医学院 基础医学院形态学实验室，贵州 遵义563099)

    目的 探讨20-HETE加重大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的作用及机制。方法 雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con组)，缺血再灌注模型组(IR组)，IR+20-HETE合成酶抑制剂(HET0016)组，Con+HET0016组，每组12只，通过Langendorff灌流系统建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型，全心缺血35 min再灌注40 min，PowerLab/8P系统实时监测心肌力学指标；灌流结束后取心肌组织TTC法检测心肌梗死面积；DHE荧光探针法检测活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)含量；Western blot检测NADPH氧化酶亚基p47phox磷酸化水平；细胞色素C的还原法检测NADPH氧化酶活性。结果 离体心脏缺血再灌注后，加入20-HETE合成酶抑制剂HET0016(1 μmol/L)后明显改善了IR导致的心肌力学指标下降，LVDP由IR组的(48.6±3.4)%升至(71.7±3.5)%，+dP/dtmax由(51.9±2.1)%升至(69±3.2)%，-dP/dtmax由(47.1±3.6)%升至(64.1±3.8)%(P1 材料与方法

    1.1实验动物及试剂雄性Wistar大鼠(220±20)g随机分为正常对照组(Con组)，缺血再灌注模型组(IR组)，IR+20-HETE合成酶抑制剂(HET0016)组，Con+HET0016组，每组12只，实验前标准饮食饲养1周。

    20-HETE购于Sigma公司，ROS检测试剂盒及NADPH氧化酶活性检测试剂盒购于南京建成生物制品公司，特异性p47phox和磷酸化p47phox抗体、HRP标记的二抗购自Santa生物技术公司，其他试剂均采用化学分析纯。

    1.2方法

    1.2.1动物模型建立大鼠使用乌拉坦(1 g/kg)腹腔注射麻醉，开胸取出心脏置于4 ℃的KH液(含肝素，50 U/mL)中修剪 ......